(12)发明专利申请
(10)申请公布号(10)申请公布号 CN 104983944 A (43)申请公布日(43)申请公布日 2015.10.21
(21)申请号 201510329882.0(22)申请日 2015.06.15
(71)申请人山东大学
地址250100 山东省济南市山大南路27号(72)发明人许金珂 田景振 侯林
(74)专利代理机构北京众合诚成知识产权代理
有限公司 11246
代理人龚燮英(51)Int.Cl.
A61K 36/88(2006.01)A61P 31/04(2006.01)A61P 31/12(2006.01)A61P 31/16(2006.01)
权利要求书3页 说明书15页
(54)发明名称
一种复合中药抗菌抗病毒剂及其制备方法和用途(57)摘要
本发明涉及一种复合中药抗菌抗病毒剂，所述复合中药抗菌抗病毒剂包括柴胡提取物、穿心莲提取物、黄芩提取物、玄参提取物、金银花提取物、板蓝根提取物、淫羊藿提取物、艾叶、甘草、蒲公英、杏仁、龙胆草、射干、大青叶、薄荷。所述复合中药抗菌抗病毒剂由于特定的组分选择、提取方法等从而取得了良好的抗菌抗病毒效果，在医药领域具有良好的应用前景和工业化应用潜力。
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权 利 要 求 书
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1.一种复合中药抗菌抗病毒剂，所述复合中药抗菌抗病毒剂包括柴胡提取物、穿心莲提取物、黄芩提取物、玄参提取物、金银花提取物、板蓝根提取物、淫羊藿提取物、艾叶、甘草、蒲公英、杏仁、龙胆草、射干、大青叶、薄荷。
2.如权利要求1所述的复合中药抗菌抗病毒剂，其特征在于：重量份计，所述复合中药抗菌抗病毒剂的具体组分含量如下：
3.如权利要求1或2所述的复合中药抗菌抗病毒剂，其特征在于：所述柴胡提取物是按照如下步骤制得的，或者说其制备方法包括如下步骤：
S1：将柴胡药材粉碎并研磨，过50目筛，将得到的柴胡粉末加入到膨胀溶剂中，然后加压至5-6MPa形成膨胀溶剂体系，在40-50℃下搅拌提取40-50分钟，提取结束后，泄压至常压，将所得溶液过滤，得到提取液；
S2：将提取液减压浓缩，得到粘稠残留物，将所述残留物溶于适量乙醇中，上300-400目硅胶色谱柱，先后用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇与丙酮的混合溶剂进行洗脱，收集正丁醇与丙酮的混合溶剂的洗脱液，减压浓缩，将所得残留物经干燥、粉碎，研磨过100目筛，即得所述柴胡提取物。
4.如权利要求1-3任一项所述的复合中药抗菌抗病毒剂，其特征在于：所述穿心莲提取物是按照如下步骤制得的，或者说其制备方法包括如下步骤：
I：将穿心莲充分干燥至恒重，然后加入到15倍重量的去离子水中，加热至70-80℃，浸提60-80分钟，过滤，得浸提液；
II、将浸提液浓缩为原来体积的1/7-1/5，得到浓缩液；向浓缩液中加入2倍体积的氯仿，充分振荡，分层，得到上层的氯仿相和下层水相；将下层水相先后用等体积的乙酸乙酯
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权 利 要 求 书
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萃取2-3次，合并每次的乙酸乙酯相，并减压浓缩，将残留物溶于丙酮中，丙酮的用量为恰恰将残留物溶解完全的量，得到粗提液；
III、将粗提液上D110树脂，以体积比为2:1的正丁醇-乙酸乙酯进行洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，将得到膏状物真空干燥、粉碎，研磨成粉末，过100目筛，即为所述穿心莲提取物。
5.如权利要求1-4任一项所述的复合中药抗菌抗病毒剂，其特征在于：所述黄芩提取物是按照如下步骤制得的，或者说其制备方法包括如下步骤：
(1)将黄芩加入到无水乙醇与乙酸乙酯的混合溶剂中，于40-50℃下，使用200-250W的微波功率进行微波萃取，时间为80-100分钟，萃取完成后，过滤，得到滤液，将滤液浓缩得到浓缩膏状物；
(2)将浓缩膏状物加入到适量无水乙醇中，将其恰好溶解，得到乙醇溶液，然后上300-400目硅胶柱；
(3)使用不同体积比的正丁醇与石油醚的混合溶剂进行梯度洗脱，收集特定的洗脱液，然后减压浓缩，得到的残留物经干燥、研磨过100目筛，即得所述黄芩提取物。
6.如权利要求1-5任一项所述的复合中药抗菌抗病毒剂，其特征在于：所述玄参提取物是按照如下步骤制得的，或者说其制备方法包括如下步骤：
1：称取玄参，干燥至恒重，粉碎研磨，过100目筛，得到玄参粉末；2：将玄参粉末加入到10-15倍重量的质量百分比浓度为50％的乙醇水溶液中，加热回流提取60-100分钟，冷却，过滤得滤液；
3：向滤液中加入为其体积5-10％的质量百分比浓度为10％的碳酸氢钠水溶液，充分振荡混合，得混合体系；然后再加入与所述混合体系等体积的正己烷，充分振荡萃取，分离得正己烷相和水相；
4：向水相中加入为其体积1/5-1/4的乙酸乙酯，充分振荡萃取，将乙酸乙酯相真空浓缩，所得残留物经干燥、研磨过100目筛，即得所述玄参提取物。
7.如权利要求1-6任一项所述的复合中药抗菌抗病毒剂，其特征在于：所述金银花提取物是按照如下步骤制得的，或者说其制备方法包括如下步骤：
A：将金银花粉碎成粉末，加入到质量百分比浓度为30-40％的乙醇水溶液中，再加入15-冠-6作为提取助剂，在80-90℃下搅拌40-60分钟，然后过滤得到提取液；
B：将提取液用等体积的乙酸乙酯充分振荡萃取，静置分层，取上层有机相，煎煮液减压浓缩，得到浓缩物；将所述浓缩物加入到为其质量8-10倍的无水乙醇中，溶解完全，得到乙醇溶液；
C：向乙醇溶液中加入等体积的石油醚，充分振荡，得到石油醚相和水相I；将水相I用等体积氯仿萃取，得到氯仿相和水相II；将氯仿相减压浓缩，直至氯仿全部除去，得到的残留物经干燥、研磨过100目筛，即得所述金银花提取物。
8.如权利要求1-7任一项所述的复合中药抗菌抗病毒剂，其特征在于：述板蓝根提取物和所述淫羊藿提取物的制备方法为：将板蓝根或淫羊藿充分干燥后，粉碎，过50目筛，得到粉末；将所述粉末加入到质量百分比浓度为40-50％的乙醇水溶液中，于70-80℃下回流提取1-2小时，过滤，得提取液，将提取液减压浓缩，直至无醇味，将所得膏状物真空干燥，研磨，过100目筛，从而分别得到所述板蓝根提取物或所述淫羊藿提取物。
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权 利 要 求 书
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9.权利要求1-8任一项所述的复合中药抗菌抗病毒剂的制备方法，所述方法步骤如下步骤：
F1：分别称取各个组分；F2：分别将艾叶、甘草、蒲公英、杏仁、龙胆草、射干、大青叶和薄荷进行研磨，过100目筛，得到各个微粉；
F3：将步骤F2中的各个微粉与上述权利要求3-8分别所制得的柴胡提取物、穿心莲提取物、黄芩提取物、玄参提取物、金银花提取物、板蓝根提取物和淫羊藿提取物进行充分混合，即得所述复合中药抗菌抗病毒剂。
10.权利要求1-8任一项所述的复合中药抗菌抗病毒剂在制备抗菌抗病毒药物中的用途。
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说 明 书
一种复合中药抗菌抗病毒剂及其制备方法和用途
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技术领域
本发明涉及一种复合中药抗菌抗病毒剂及其制备方法，更具体地涉及一种具有抗菌抗病毒功能的复合中药抗菌抗病毒剂及其制备方法和用途，属于中药活性成分复合中药抗菌抗病毒剂技术领域。
[0001]
背景技术
在人类的致病因素中，很大一部分是由于病毒导致的，尤其是在多种流行性疾病
中，病毒是最主要的发病因素。[0003] 随着科技的进步，目前，已经发现了数以千计的病毒种类，这些病毒在人类历史上已经引发了多次大流行性的疾病，例如西班牙大流感、疯牛病、非典型性肺炎、主要在家禽之间传播的禽流感等，以及最近在韩国爆发的中东呼吸综合征(Mers)，所有的这些疾病都是由病毒引发的。
[0004] 除了这些流行性疾病外，病毒还可导致多种疾病，例如流行性感冒、腮腺炎、水痘、脊髓灰质炎、病毒性肝炎(如乙型肝炎等)、带状疱疹、麻疹、风疹、小儿麻病症、麻风病等，此外，更有对人类健康威胁非常大的艾滋病，也是由病毒所致。[0005] 因此，如何杀灭、抑制这些病毒一直以来都是人类健康领域的重大课题，也是药物学家和科研工作者的长期努力方向和研发重点。[0006] 除病毒是一个致病因素外，细菌更是引发多种疾病的源头，如链球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎球菌、淋球菌、破伤风杆菌、痢疾杆菌、大肠杆菌、百日咳杆菌、肉毒梭菌等都是重要的致病细菌，这些细菌能够导致多种严重疾病，甚至能够危及生命。[0007] 因此，如何能够更有效的杀灭、抑制这些有害细菌，也是目前科研工作者努力的方向和科研重点。
[0008] 而在我国，中药医学一直都是我国的宝贵文化遗产和医药宝库，历代医学典籍中均记录了多种具有抗菌、抗炎、抗病毒的中药，例如板蓝根、金银花一直都是清热解毒的中医良药。
[0009] 为了充分挖掘中药宝库的精华，科研工作者对中药抗菌抗病毒进行了大量的研究，并取得了诸多成果，例如：
[0010] CN104606226A公开了一种抗菌消炎中药栓剂及其制备方法和质控方法，属于中药技术领域。该抗菌消炎中药栓剂包括按照重量份数计的如下组分：白矾48-52份、黄藤素8-12份、赤石脂38-42份、冰片8-12份、聚山梨酯18-22份、甘油明胶为900-920份。所述产品性能优异，具有抗菌、消炎、消肿、止痛、止血、收敛和化腐生肌的作用，效果非常显著，可广泛用于肛肠、妇科的炎性疾病的防治，且通过质量控制方法的控制，使得产品的疗效得到了保障。
[0002]
CN104547741A公开了一种具有抗病毒功能中药制剂，是以桃仁、薏米、鱼腥草、栀
子、马齿苋、白果、乌梅、决明子、桑叶、紫苏、薄荷为原料进行配伍，使个药物的功效产生协同，通力协作共凑活血化瘀、调节免疫、杀灭病毒功能。临床试验表明，本发明中药制剂对
[0011]
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说 明 书
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于扁平疣、尖锐湿疣等病毒具有很好的治疗效果，另外对人类乳头瘤病毒引发的各种病症(皮肤和粘膜低危型及高危型问题，如扁平疣、寻常疣、尖锐湿疣、宫颈癌早期)、乙型肝炎病毒、各种感冒病毒等也具有很好调理作用。
[0012] CN104288287A公开了一种抗炎杀菌抗病毒的中药组合物，所述组合物包括以下重量份的原料药及辅料：黄连100-1000份、黄芩100-1000份、黄芪600-1800份、白花蛇舌草500-1500份、甘草100-800份、稀释剂50-800份、矫味剂10-40份，润湿剂适量。所述组合物适宜肥胖人群、糖尿病患者服用，便于儿童患者用药，扩大了适宜人群。[0013] CN104147583A公开了一种消炎抗病毒的中药组合物，组分及重量分数如下：明雄、北细辛、牙皂、枯矾、甘草、朱砂、辰砂、藿香、桔梗、防风、木香、贯众、陈皮、苏薄荷、法半夏、干姜、漏庐、鱼腥草、白芷、儿茶、石葛蒲、血竭。所述中药组合物包含22味中药，具有各药性的成分之间相互配伍，制成后的中药具有强效消炎、抗病毒的作用，通过药性证实，本组合物对由细菌和病毒感染引起的各种炎症和疼痛症状具有较好的治疗作用。[0014] CN104127779A公开了一种抗菌消炎的中草药复方洗液及其制备方法，所述中草药复方洗液由以下重量百分比的原料制成：黄连灰渣20-30％、苦参15-20％、黄柏5-10％、蛇床子15-20％、土茯苓15-20％、花椒5-10％、百部5-10％、薄荷0.2-2.0％、醋酸氯氯已定1.0-3.0％、聚山梨酯2-3％、余量为苯甲基酸钠。所述中草药洗液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌等病原性微生物引起的各种外阴及阴道瘙痒等具有较强的杀灭作用。[0015] CN104189231A公开了一种用于抗病毒增强免疫的中药制剂及其制备方法。以重量份计，该中药制剂的组成为：苜蓿5-10份、白术3-7份、熟地3-8份、甘草5-12份、茯苓6-13份、板蓝根6-11份、陈皮4-9份、丹参5-13份、鱼腥草3-7份、当归3-8份、党参5-10份、产酶益生素5-10份、莽草酸20-40份。所述中药制剂的各成分相互配伍、协调作用，能够调节机体平衡，适用于增强猪只的抗病力能力和免疫力。
[0016] CN103705773A公开了一种抗菌消炎中药组合物及其制备方法，制成该中药组合物的方法主要为：取广金钱草、玉米须、石韦、鸡骨草、茯苓、车前草、海金沙草、白茅根共8味药材，广金钱草、石韦、海金沙草、鸡骨草、车前草用碱性水溶液提取，白茅根、茯苓、玉米须水提，最后合并两种提取方法所得流浸膏。通过动物药效实验及临床试验，结果证明所述中药组合物在治疗泌尿系统结石时，抗菌消炎效果优于现有技术。
[0017] CN103211997A公开了一种抗菌抗病毒的中药组合物法及其制备方法，所述抗菌抗病毒中药组合物包括：苏叶、白芷、蔓荆子、葛根、连翘、南板蓝根、蒲公英、鱼腥草、马鞭草、射干、芦根、知母，三桠苦、石膏、生地、青蒿、薏苡仁、冬瓜仁、乌梅、甘草、桔梗；所述制备方法包括：将苏叶，白芷，蔓荆子等药材混合，得到药材混合物；将所述药材混合物研磨成粉末；将所述药材混合物的粉末制成中药制剂。所述中药组合物法由中药成分组合而成，避免了服用西药产生的副作用，同时可以实现一种配方治疗多种病症的目的，适应症广。[0018] CN102379958A公开了一种用于抗菌消炎、化痰止咳的中药制剂及其制备方法。该制剂由鱼腥草、冰片、甘草、桔梗、远志、苦杏仁、黄芪、氨茶碱等中西药原料制成，可用于治疗呼吸道感染引起的炎症、咳嗽多痰、气促、气喘等症，能够发挥中药的传统优势，具有显著消炎止咳祛痰的作用，可缓解和消除呼吸道感染症状并能具有抗病理性疲劳的意外效果，使用方便，未见明显副作用。
[0019] CN102440266A公开了一种抗菌、抑菌、杀菌的中药制剂及其制备方法，主要是由亳
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菊花、薄荷、金银花、千里光、大青叶按比例配制经纯化水煎煮提取、分离、精制而成，具有抗菌范围广、速度快、无毒、无刺激、无毒副作用等优点，可广泛应用于各种公共场所，家庭居室，医疗机构及人体各部位的抗抑菌护理，可有效阻止各种疾病对人体的侵袭。[0020] 如上所述，虽然现有技术中公开了多种中药抗菌抗病毒剂，但对于新型的复合中药抗菌抗病毒剂仍存在继续研究的必要，这不但对于挖掘中药应用具有重要意义，而且能够提供新型的、安全、无副作用的中药抗菌抗病毒剂，也能进一步拓展中药的应用领域和潜力，从而在实际治疗和工业化生产中具有良好的应用潜力和价值。所有的这些，都是本发明得以完成的动力所在和基础所倚。发明内容
为获得新型的复合中药抗菌抗病毒剂及其制备方法和应用，本发明人对此进行了
大量的深入研究，在付出了充分的创造性劳动后，从而完成了本发明。
[0022] 本发明主要涉及一种复合中药抗菌抗病毒剂及其制备方法和用途，更具体而言，主要涉及如下几个方面。[0023] 第一个方面，本发明涉及一种复合中药抗菌抗病毒剂，所述复合中药抗菌抗病毒剂包括柴胡提取物、穿心莲提取物、黄芩提取物、玄参提取物、金银花提取物、板蓝根提取物、淫羊藿提取物、艾叶、甘草、蒲公英、杏仁、龙胆草、射干、大青叶、薄荷。[0024] 在本发明的所述复合中药抗菌抗病毒剂中，重量份计，所述复合中药抗菌抗病毒剂的具体组分含量如下：
[0021] [0025]
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在本发明的所述复合中药抗菌抗病毒剂中，涉及组成的“包括”，既包含了开放式的“包括”、“包含”等及其类似含义，也包含了封闭式的“由…组成”等及其类似含义。[0028] 在本发明的所述复合中药抗菌抗病毒剂中，艾叶、甘草、蒲公英、杏仁、龙胆草、射干、大青叶、薄荷的形式并没有严格的限定，例如可为中药药店出售的本身形式，例如为小块、粉末等形式，优选为粉碎后得到的微粉形式。[0029] 同样的，制备“柴胡提取物、穿心莲提取物、黄芩提取物、玄参提取物、金银花提取物、板蓝根提取物、淫羊藿提取物”时所使用的原料柴胡、穿心莲、黄芩、玄参、金银花、板蓝根、淫羊藿也可为购自中药药店的成品形式。
[0030] 在本发明的所述复合中药抗菌抗病毒剂中，所述柴胡提取物的重量份数为0.2-0.5份，如为0.2份、0.3份、0.4份或0.5份。[0031] 其中，所述柴胡提取物是按照如下步骤制得的，或者说其制备方法包括如下步骤：
[0032] S1：将柴胡药材粉碎并研磨，过50目筛，将得到的柴胡粉末加入到膨胀溶剂中，然后加压至5-6MPa形成膨胀溶剂体系，在40-50℃下搅拌提取40-50分钟，提取结束后，泄压至常压，将所得溶液过滤，得到提取液；[0033] S2：将提取液减压浓缩，得到粘稠残留物，将所述残留物溶于适量乙醇中，上300-400目硅胶色谱柱，先后用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇与丙酮的混合溶剂进行洗脱，收集正丁醇与丙酮的混合溶剂的洗脱液，减压浓缩，将所得残留物经干燥、粉碎，研磨过100目筛，即得所述柴胡提取物。[0034] 其中，在步骤S1中，所述膨胀溶剂是丙酮与CO2的混合物，两者的体积比为1:7-9，例如可为1:7、1:8或1:9。[0035] 其中，在步骤S1中，以质量克(g)计的所述柴胡粉末与以体积毫升(ml)计的所述膨胀溶剂的比为1:3-4g/ml，即每1g所述柴胡粉末加入到3-4ml的所述膨胀溶剂中。[0036] 其中，在步骤S2中，将所述残留物溶于适量乙醇中，乙醇的用量并无严格限定，例如可为恰恰将残留物溶解完全为宜，这样也方便后续的操作。[0037] 其中，在步骤S2中，所述残留物与硅胶(即硅胶色谱柱中所装填的硅胶)的质量比为1:30-50，例如可为1:30、1:40或1:50。[0038] 其中，在步骤S2中，洗脱所用的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇与丙酮的混合溶剂的用量分别为硅胶柱中硅胶装填体积的2-3倍、1.5-3倍和1-2倍。[0039] 其中，在步骤S2中，所述正丁醇与丙酮的混合溶剂中，正丁醇与丙酮的体积比为1:1.5-2.5，例如可为1:1.5、1:2或1:2.5。
[0040] 在本发明的所述复合中药抗菌抗病毒剂中，所述穿心莲提取物的重量份数为0.1-0.5份，如为0.1份、0.2份、0.3份、0.4份或0.5份。[0041] 其中，所述穿心莲提取物是按照如下步骤制得的，或者说其制备方法包括如下步骤：
[0042] I：将穿心莲充分干燥至恒重，然后加入到15倍重量的去离子水中，加热至70-80℃，浸提60-80分钟，过滤，得浸提液；II、将浸提液浓缩为原来体积的1/7-1/5，得到浓缩液；向浓缩液中加入2倍体积的氯仿，充分振荡，分层，得到上层的氯仿相和下层水相；将下层水相先后用等体积的乙酸
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乙酯萃取2-3次，合并每次的乙酸乙酯相，并减压浓缩，将残留物溶于丙酮中，丙酮的用量为恰恰将残留物溶解完全的量，得到粗提液；[0044] III、将粗提液上D110树脂，以体积比为2:1的正丁醇-乙酸乙酯进行洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，将得到膏状物真空干燥、粉碎，研磨成粉末，过100目筛，即为所述穿心莲提取物。
[0045] 在本发明的所述复合中药抗菌抗病毒剂中，所述黄芩提取物的重量份数为1-2份，如为1份、1.2份、1.4份、1.6份、1.8份或2份。[0046] 其中，所述黄芩提取物是按照如下步骤制得的，或者说其制备方法包括如下步骤：
[0047] (1)将黄芩加入到无水乙醇与乙酸乙酯的混合溶剂中，于40-50℃下，使用200-250W的微波功率进行微波萃取，时间为80-100分钟，萃取完成后，过滤，得到滤液，将滤液浓缩得到浓缩膏状物；
[0048] (2)将浓缩膏状物加入到适量无水乙醇中，将其恰好溶解，得到乙醇溶液，然后上300-400目硅胶柱；
[0049] (3)使用不同体积比的正丁醇与石油醚的混合溶剂进行梯度洗脱，收集特定的洗脱液，然后减压浓缩，得到的残留物经干燥、研磨过100目筛，即得所述黄芩提取物。[0050] 其中，在步骤(2)中，浓缩膏状物与硅胶柱中的硅胶的质量比为1:40-80，例如可为1:40、1:60或1:80。[0051] 其中，在步骤(3)中，使用不同体积比的正丁醇与石油醚的混合溶剂进行梯度洗脱，正丁醇与石油醚的体积比为分别为10:1、7:1、5:1、4:1和2:1，每个不同体积比的混合溶剂用量均为柱装填体积的1.5-1.8倍；收集其中体积比为5:1和4:1的洗脱液。[0052] 在本发明的所述复合中药抗菌抗病毒剂中，所述玄参提取物的重量份数为1.2-1.6份，如为1.2份、1.4份或1.6份。[0053] 其中，所述玄参提取物是按照如下步骤制得的，或者说其制备方法包括如下步骤：
[0054] 1：称取玄参，干燥至恒重，粉碎研磨，过100目筛，得到玄参粉末；[0055] 2：将玄参粉末加入到10-15倍重量的质量百分比浓度为50％的乙醇水溶液中，加热回流提取60-100分钟，冷却，过滤得滤液；[0056] 3：向滤液中加入为其体积5-10％的质量百分比浓度为10％的碳酸氢钠水溶液，充分振荡混合，得混合体系；然后再加入与所述混合体系等体积的正己烷，充分振荡萃取，分离得正己烷相和水相；[0057] 4：向水相中加入为其体积1/5-1/4的乙酸乙酯，充分振荡萃取，将乙酸乙酯相真空浓缩，所得残留物经干燥、研磨过100目筛，即得所述玄参提取物。[0058] 在本发明的所述复合中药抗菌抗病毒剂中，所述金银花提取物的重量份数为2-2.5份，如为2份、2.2份、2.4份或2.5份。[0059] 其中，所述金银花提取物是按照如下步骤制得的，或者说其制备方法包括如下步骤：
A：将金银花粉碎成粉末，加入到质量百分比浓度为30-40％的乙醇水溶液中，再
加入15-冠-6作为提取助剂，在80-90℃下搅拌40-60分钟，然后过滤得到提取液；
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B：将提取液用等体积的乙酸乙酯充分振荡萃取，静置分层，取上层有机相，煎煮液减压浓缩，得到浓缩物；将所述浓缩物加入到为其质量8-10倍的无水乙醇中，溶解完全，得到乙醇溶液；[0062] C：向乙醇溶液中加入等体积的石油醚，充分振荡，得到石油醚相和水相I；将水相I用等体积氯仿萃取，得到氯仿相和水相II；将氯仿相减压浓缩，直至氯仿全部除去，得到的残留物经干燥、研磨过100目筛，即得所述金银花提取物。[0063] 其中，在步骤A中，所述粉末与质量百分比浓度为30-40％的乙醇水溶液的质量比为1:10-20，例如可为1:10、1:15或1:20。[0064] 其中，在步骤A中，所述粉末与15-冠-6的质量比为1:0.05-0.1，例如可为1:0.05、1:0.07、1:0.09或1:0.1。
[0065] 在本发明的所述复合中药抗菌抗病毒剂中，所述板蓝根提取物的重量份数为1.5-2.5份，如为1.5份、1.7份、1.9份、2份、2.2份、2.4份或2.5份。[0066] 在本发明的所述复合中药抗菌抗病毒剂中，所述淫羊藿提取物的重量份数为0.3-0.8份，如为0.3份、0.5份、0.7份或0.8份。[0067] 其中，所述板蓝根提取物和所述淫羊藿提取物的制备方法为：将板蓝根或淫羊藿充分干燥后，粉碎，过50目筛，得到粉末(即板蓝根粉末或淫羊藿粉末)；将所述粉末加入到质量百分比浓度为40-50％的乙醇水溶液中，于70-80℃下回流提取1-2小时，过滤，得提取液，将提取液减压浓缩，直至无醇味，将所得膏状物真空干燥，研磨，过100目筛，从而分别得到所述板蓝根提取物或所述淫羊藿提取物。[0068] 其中，所述粉末与质量百分比浓度为40-50％的乙醇水溶液的质量比为1:15-25，例如可为1:15、1:20或1:25。
[0069] 在本发明的所述复合中药抗菌抗病毒剂中，所述艾叶的重量份数为2-4份，如为2份、2.5份、3份、3.5份或4份。
[0070] 在本发明的所述复合中药抗菌抗病毒剂中，所述甘草的重量份数为3-6份，如为3份、3.5份、4份、4.5份、5份、5.5份或6份。
[0071] 在本发明的所述复合中药抗菌抗病毒剂中，所述蒲公英的重量份数为3-4份，如为3份、3.2份、3.4份、3.6份、3.8份或4份。
[0072] 在本发明的所述复合中药抗菌抗病毒剂中，所述杏仁的重量份数为1-2.4份，如为1份、1.2份、1.4份、1.6份、1.8份、2份、2.2份或2.4份。[0073] 在本发明的所述复合中药抗菌抗病毒剂中，所述龙胆草的重量份数为0.5-1.2份，如为0.5份、0.7份、0.9份、1份或1.2份。
[0074] 在本发明的所述复合中药抗菌抗病毒剂中，所述射干的重量份数为1-1.8份，如为1份、1.2份、1.4份、1.6份或1.8份。
[0075] 在本发明的所述复合中药抗菌抗病毒剂中，所述大青叶的重量份数为2-2.6份，如为2份、2.2份、2.4份或2.6份。
[0076] 在本发明的所述复合中药抗菌抗病毒剂中，所述薄荷的重量份数为0.2-0.7份，如为0.2份、0.4份、0.6份或0.7份。如上所述，本发明提供了一种复合中药抗菌抗病毒剂，发明人发现通过特定的提取工艺，使得最终所得到的抗菌抗病毒剂具有优良的抗菌抗病毒性能，从而可应用于医药
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领域，且安全无毒、无副作用，具有良好的应用前景和工业化潜力。[0078] 第二个方面，本发明涉及上述复合中药抗菌抗病毒剂的制备方法，所述方法步骤如下步骤：[0079] F1：分别称取各个组分；[0080] F2：分别将艾叶、甘草、蒲公英、杏仁、龙胆草、射干、大青叶和薄荷进行研磨，过100目筛，得到各个微粉；[0081] F3：将步骤F2中的各个微粉与上述制得的柴胡提取物、穿心莲提取物、黄芩提取物、玄参提取物、金银花提取物、板蓝根提取物和淫羊藿提取物进行充分混合，即得所述复合中药抗菌抗病毒剂。[0082] 此外，在均匀混合后，还可将步骤F3中得到的所述复合中药抗菌抗病毒剂连同医药领域中常用的各种辅料(如水、矫味剂、赋形剂等)进一步制成不同形式的制剂，例如糖浆剂、片剂、丸剂、水蜜丸等，这属于本领域中的常规技术手段，在此不再一一赘述。[0083] 第三个方面，本发明涉及上述复合中药抗菌抗病毒剂在制备抗菌抗病毒药物中的用途。
[0084] 例如，该复合中药抗菌抗病毒剂可用来制备抗甲型流感的药物，以及用来制备抗细菌感染如金黄色葡萄球菌、链球菌、大肠杆菌所导致的疾病的药物。
[0085] 由于本发明的上述复合中药抗菌抗病毒剂具有抗菌抗病毒性能，因此可以用来制备抗菌抗病毒药物(当然，所述复合中药抗菌抗病毒剂本身即可直接服用，但为了服用方便、赋形改性等考虑，可进一步加入各种辅料制成各种剂型)，例如如上所述，可以同医药领域中常用的各种辅料进一步制成不同形式的制剂，例如口服液、糖浆剂、片剂、丸剂、水蜜丸等，这属于本领域中的常规技术手段，在此不再一一赘述。[0086] 综合上述，本发明提供了一种复合中药抗菌抗病毒剂及其制备方法和用途，所述复合中药抗菌抗病毒剂具有优良的抗菌抗病毒性能，从而可用来制备抗菌抗病毒药物，在医药领域具有良好的应用前景和工业化潜力。
具体实施方式
[0087] 下面通过具体的实施例对本发明进行详细说明，但这些例举性实施方式的用途和目的仅用来例举本发明，并非对本发明的实际保护范围构成任何形式的任何限定，更非将本发明的保护范围局限于此。[0088] 其中，在所有实施例和对比例中，所使用的各种提取物均为各个制备例中的相应提取物。
[0089] 制备例1：柴胡提取物的制备[0090] S1：将柴胡药材粉碎并研磨，过50目筛，将得到的柴胡粉末加入到膨胀溶剂(为丙酮与CO2的混合物，两者的体积比为1:8)中，然后加压至5.5MPa形成膨胀溶剂体系，在45℃下搅拌提取45分钟，提取结束后，泄压至常压，将所得溶液过滤，得到提取液；[0091] 其中，以质量克(g)计的所述柴胡粉末与以体积毫升(ml)计的所述膨胀溶剂的比为1:3.5g/ml。
S2：将提取液减压浓缩，得到粘稠残留物，将所述残留物溶于适量乙醇中，上
300-400目硅胶色谱柱(所述残留物与硅胶的质量比为1:40)，先后用石油醚、乙酸乙酯、正
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丁醇与丙酮的混合溶剂进行洗脱，收集正丁醇与丙酮的混合溶剂的洗脱液，减压浓缩，将所得残留物经干燥、粉碎，研磨过100目筛，即得所述柴胡提取物，命名为CH；[0093] 其中，洗脱所用的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇与丙酮的混合溶剂的用量分别为硅胶柱中硅胶装填体积的2.5倍、2.5倍和1.5倍，以及所述正丁醇与丙酮的混合溶剂中，正丁醇与丙酮的体积比为1:2。[0094] 制备例2：穿心莲提取物的制备[0095] I：将穿心莲充分干燥至恒重，然后加入到15倍重量的去离子水中，加热至75℃，浸提70分钟，过滤，得浸提液；[0096] II、将浸提液浓缩为原来体积的1/6，得到浓缩液；向浓缩液中加入2倍体积的氯仿，充分振荡，分层，得到上层的氯仿相和下层水相；将下层水相先后用等体积的乙酸乙酯萃取2-3次，合并每次的乙酸乙酯相，并减压浓缩，将残留物溶于丙酮中，丙酮的用量为恰恰将残留物溶解完全的量，得到粗提液；[0097] III、将粗提液上D110树脂，以体积比为2:1的正丁醇-乙酸乙酯进行洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，将得到膏状物真空干燥、粉碎，研磨成粉末，过100目筛，即为所述穿心莲提取物，命名为CXL。[0098] 制备例3：黄芩提取物的制备
[0099] (1)将黄芩加入到无水乙醇与乙酸乙酯的混合溶剂中，于45℃下，使用230W的微波功率进行微波萃取，时间为90分钟，萃取完成后，过滤，得到滤液，将滤液浓缩得到浓缩膏状物；
[0100] (2)将浓缩膏状物加入到适量无水乙醇中，将其恰好溶解，得到乙醇溶液，然后上300-400目硅胶柱；[0101] 其中，浓缩膏状物与硅胶柱中的硅胶的质量比为1:60。
[0102] (3)使用不同体积比的正丁醇与石油醚的混合溶剂进行梯度洗脱，收集特定的洗脱液(其中，所述“不同体积比的正丁醇与石油醚的混合溶剂”中，正丁醇与石油醚的体积比为分别为10:1、7:1、5:1、4:1和2:1，每个不同体积比的混合溶剂用量均为柱装填体积的1.6倍；收集其中体积比为5:1和4:1的洗脱液)，然后减压浓缩，得到的残留物经干燥、研磨过100目筛，即得所述黄芩提取物，命名为HQ。[0103] 制备例4：玄参提取物的制备[0104] 1：称取玄参，干燥至恒重，粉碎研磨，过100目筛，得到玄参粉末；[0105] 2：将玄参粉末加入到12倍重量的质量百分比浓度为50％的乙醇水溶液中，加热回流提取80分钟，冷却，过滤得滤液；[0106] 3：向滤液中加入为其体积7％的质量百分比浓度为10％的碳酸氢钠水溶液，充分振荡混合，得混合体系；然后再加入与所述混合体系等体积的正己烷，充分振荡萃取，分离得正己烷相和水相；[0107] 4：向水相中加入为其体积1/5的乙酸乙酯，充分振荡萃取，将乙酸乙酯相真空浓缩，所得残留物经干燥、研磨过100目筛，即得所述玄参提取物，命名为XS。制备例5：金银花提取物的制备[0109] A：将金银花粉碎成粉末，加入到质量百分比浓度为35％的乙醇水溶液中，再加入15-冠-6作为提取助剂，在85℃下搅拌50分钟，然后过滤得到提取液；
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其中，所述粉末与质量百分比浓度为30-40％的乙醇水溶液的质量比为1:15，所述粉末与15-冠-6的质量比为1:0.08。[0111] B：将提取液用等体积的乙酸乙酯充分振荡萃取，静置分层，取上层有机相，煎煮液减压浓缩，得到浓缩物；将所述浓缩物加入到为其质量9倍的无水乙醇中，溶解完全，得到乙醇溶液；[0112] C：向乙醇溶液中加入等体积的石油醚，充分振荡，得到石油醚相和水相I；将水相I用等体积氯仿萃取，得到氯仿相和水相II；将氯仿相减压浓缩，直至氯仿全部除去，得到的残留物经干燥、研磨过100目筛，即得所述金银花提取物，命名为JYH。[0113] 制备例6：板蓝根提取物和淫羊藿提取物的制备[0114] 分别将板蓝根和淫羊藿充分干燥后，粉碎，过50目筛，得到粉末)；分别将所得粉末加入到质量百分比浓度为45％的乙醇水溶液中(所述粉末与质量百分比浓度为45％的乙醇水溶液的质量比为1:20)，于75℃下回流提取1.5小时，过滤，得提取液，将提取液减压浓缩，直至无醇味，将所得膏状物真空干燥，研磨，过100目筛，从而分别得到所述板蓝根提取物(命名为BLG)或所述淫羊藿提取物(命名为YYH)。[0115] 对比制备例1-3：对比柴胡提取物的制备[0116] 对比制备例1：除步骤S2中未进行石油醚洗脱外，其它均与制备例1相同，将得到的柴胡提取物命名为DCH1。[0117] 对比制备例2：除步骤S2中未进行乙酸乙酯洗脱外，其它均与制备例1相同，将得到的柴胡提取物命名为DCH2。[0118] 对比制备例3：除步骤S2中未进行石油醚洗脱和乙酸乙酯洗脱外，其它均与制备例1相同(即仅仅使用正丁醇与丙酮的混合溶剂进行洗脱)，将得到的柴胡提取物命名为DCH3。
[0119] 对比制备例4：对比黄芩提取物的制备
[0120] 除步骤(3)中未使用正丁醇与石油醚的体积比为分别为10:1、7:1的混合溶剂进行洗脱外(即直接使用体积比为5:1、4:1和2:1的混合溶剂进行洗脱)，其它操作均与制备例3相同，将得到的黄芩提取物命名为DHQ。[0121] 对比制备例5：对比玄参提取物的制备
[0122] 除步骤2中未加入质量百分比浓度为10％的碳酸氢钠水溶液外，其它操作均与制备例4相同，将得到的玄参提取物命名为DXS。[0123] 对比制备例6：对比金银花提取物的制备[0124] 除步骤A中未加入15-冠-6外，其它操作均与制备例5相同，将得到的金银花提取物命名为DJYH。[0125] 实施例1[0126] F1：分别称取0.2重量份柴胡提取物CH、0.1重量份穿心莲提取物CHX、1重量份黄芩提取物HQ、1.2重量份玄参提取物XS、2重量份金银花提取物JYH、1.5重量份板蓝根提取物BLG、0.3重量份淫羊藿提取物YYH、2重量份艾叶、3重量份甘草、3重量份蒲公英、1重量份杏仁、0.5重量份龙胆草、1重量份射干、2重量份大青叶和0.2重量份薄荷；F2：分别将上述的艾叶、甘草、蒲公英、杏仁、龙胆草、射干、大青叶和薄荷进行研磨，过100目筛，得到各个微粉；
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F3：将步骤F2中的各个微粉与步骤F1中的柴胡提取物CH、穿心莲提取物CXL、黄芩提取物HQ、玄参提取物XS、金银花提取物JYH、板蓝根提取物BLG和淫羊藿YYH提取物进行充分混合，即得所述复合中药抗菌抗病毒剂，命名为制剂1，缩小为ZJ1。[0129] 实施例2[0130] F1：分别称取0.3重量份柴胡提取物CH、0.5重量份穿心莲提取物CHX、2重量份黄芩提取物HQ、1.4重量份玄参提取物XS、2.2重量份金银花提取物JYH、2重量份板蓝根提取物BLG、0.8重量份淫羊藿提取物YYH、3重量份艾叶、5重量份甘草、3.5重量份蒲公英、1.6重量份杏仁、1.2重量份龙胆草、1.4重量份射干、2.3重量份大青叶和0.7重量份薄荷；[0131] F2：分别将上述的艾叶、甘草、蒲公英、杏仁、龙胆草、射干、大青叶和薄荷进行研磨，过100目筛，得到各个微粉；[0132] F3：将步骤F2中的各个微粉与步骤F1中的柴胡提取物CH、穿心莲提取物CXL、黄芩提取物HQ、玄参提取物XS、金银花提取物JYH、板蓝根提取物BLG和淫羊藿YYH提取物进行充分混合，即得所述复合中药抗菌抗病毒剂，命名为制剂2，缩小为ZJ2。[0133] 实施例3[0134] F1：分别称取0.5重量份柴胡提取物CH、0.3重量份穿心莲提取物CHX、1.5重量份黄芩提取物HQ、1.6重量份玄参提取物XS、2.5重量份金银花提取物JYH、2.5重量份板蓝根提取物BLG、0.6重量份淫羊藿提取物YYH、4重量份艾叶、6重量份甘草、4重量份蒲公英、2.4重量份杏仁、0.8重量份龙胆草、1.8重量份射干、2.6重量份大青叶和0.4重量份薄荷；[0135] F2：分别将上述的艾叶、甘草、蒲公英、杏仁、龙胆草、射干、大青叶和薄荷进行研磨，过100目筛，得到各个微粉；[0136] F3：将步骤F2中的各个微粉与步骤F1中的柴胡提取物CH、穿心莲提取物CXL、黄芩提取物HQ、玄参提取物XS、金银花提取物JYH、板蓝根提取物BLG和淫羊藿YYH提取物进行充分混合，即得所述复合中药抗菌抗病毒剂，命名为制剂3，缩小为ZJ3。[0137] 对比例1-3
[0138] 除将其中的柴胡提取物进行替换外，其他操作均不变，从而按照实施例1-3的相同方法进行了对比例1-3，得到的不同的制剂，具体所使用的柴胡提取物和对应关系见下表。
[0139]
对比例4-6
[0141] 除分别将实施例1-3中的黄芩提取物HQ替换为DHQ外，其他操作均不变，从而分别按照实施例1-3的相同方法进行了对比例4-6，将所得到的制剂顺次命名为DZJ4、DZJ5和DZJ6。
[0142] 对比例7-9
[0143] 除分别将实施例1-3中的玄参提取物XS替换为DXS外，其他操作均不变，从而分
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别按照实施例1-3的相同方法进行了对比例7-9，将所得到的制剂顺次命名为DZJ7、DZJ8和DZJ9。
[0144] 对比例10-12
[0145] 除分别将实施例1-3中的金银花提取物JYH替换为DJYH外，其他操作均不变，从而分别按照实施例1-3的相同方法进行了对比例10-12，将所得到的制剂顺次命名为DZJ10、DZJ11和DZJ12。[0146] 对比例13-42
[0147] 除将柴胡提取物、黄芩提取物、玄参提取物、金银花提取物中的至少两种进行替换外，其它操作均不变，从而按照实施例1-3的相同方法进行了对比例13-42，具体所使用的各个提取物和对应关系见下表。
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抗菌性能测试
[0150] 按照国家标准QB/T2738-2005滤纸片法(即抑菌圈方法)来测定各个制剂样品对
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不同细菌的抑制效果，对上述实施例和对比例中得到的不同制剂进行抗菌性能测试，具体测试方法如下：
[0151] 分别称取各个制剂，加入为其质量15倍的去离子水中，搅拌混合均匀，得到制剂悬浮液，然后将直径为7mm的滤纸片于其中浸泡40分钟，待用；
[0152] 用滴管在马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA培养基)上滴加50μL且浓度为1×107cfu/ml活化后的不同细菌液，涂匀、平整；然后将上述浸泡过的滤纸片放置于所述培养基的中央，最后在30℃恒温下培养15小时，分别测量各个不同制剂悬浮液中浸泡过的滤纸片所产生的抑菌圈大小，为了更准确起见，每个样品平行测试3次，取其平均值，作为最终的抑菌圈大小。
[0153] 具体结果见下表。
[0154]
由此可见，本发明制备方法得到的复合中药抗菌抗病毒剂具有优异的抗菌性
能，尤其对于金黄色葡萄球菌具有非常好的抑制效果。而当改变不同提取物的制备方法或步骤时，均将导致抑菌性能有所降低：由DZJ1-DZJ12、DZJ13-DZJ30、DZJ31-DZJ30和DZJ40-DZJ42可见，当改变柴胡提取物、黄芩提取物、玄参提取物、金银花提取物中的种类越多，则性能降低越明显，这证明了只有同时采用本发明各个提取物的如此制备方法时，才能相互之间发挥独特的协同效果。[0156] 此外，还可以看出，柴胡提取物的制备方法改变时(即未采用石油醚洗脱、未采用乙酸乙酯洗脱和同时未采用石油醚洗脱与乙酸乙酯洗脱)，对抑菌性能影响最为明显(见DZJ1-DZJ与DZJ4-DZJ12的数据)。[0157] 抗流感甲型病毒性能测试[0158] 具体测试步骤如下：[0159] 1、将流感甲型病毒WS株在鸡胚尿囊腔中进行培养传代，收集尿囊液作为毒种。[0160] 2、将本发明实施例2中制得的抗菌抗病毒剂ZJ2加入到10倍质量的去离子水中，加热到50℃，充分搅拌，静置，取上层清液，待用。
[0155]
3、取昆明小鼠100只，均为雄性，体重为15-20g，分为5组，每组20只，具体如下：[0162] 组Ⅰ：空白对照组。
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组Ⅱ：流感甲型病毒感染组。[0164] 组Ⅲ：流感甲型病毒感染组+低剂量灌药组(0.25m1/100g)。[0165] 组Ⅳ：流感甲型病毒感染组+中剂量灌药组(0.5m1/100g)。[0166] 组Ⅴ：流感甲型病毒感染组+高剂量灌药组(1m1/100g)。[0167] 组II-V的感染方法为将小鼠在乙醚麻醉下，以血凝滴度为700的上述尿囊液进行滴鼻感染，施加量为40μl，并对感染小鼠进行按照上述的低剂量、中剂量和高剂量灌注上述“2”中的上层清液。
[0168] 自滴鼻感染时开始计时，计算20天内各组的死亡只数，从而可计算出存活率，并根据每组中各只小鼠的存活时间可计算出平均每只的存活时间(具体到多少个小时，并换算成天数)，具体结果见下表。
[0169]
由此可见，本发明的抗菌抗病毒剂具有良好的抗流感甲型病毒的性能，当将测试样品换成ZJ1或ZJ3时，结果与上述的ZJ2结果高度类似，在此不再一一列出。[0171] 为了测试改变不同提取物时所得制剂的抗病毒性能，分别选取了DZJ13、DZJ31和DZJ40按照上述相同方法进行测试，发现死亡率和存活时间均要劣于ZJ2，以高剂量灌药组进行对比，具体结果如下。
[0170] [0172]
由此可见，当改变提取物的制备方法时，可对抗病毒效果产生显著的影响，只有采用本发明制备方法得到的提取物，才能具有最好的抗病毒效果。[0174] 综合上述，本发明的复合中药抗菌抗病毒剂由于特定的组分选择、提取方法等从而取得了良好的抗菌抗病毒效果，在医药领域具有良好的应用前景和工业化应用潜力。
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应当理解，这些实施例的用途仅用于说明本发明而非意欲限制本发明的保护范围。此外，也应理解，在阅读了本发明的技术内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各
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种改动、修改和/或变型，所有的这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的保护范围之内。
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