抗甲状腺过氧化物酶抗体

Anti-thyroid peroxidase antibody Elecsys® Systems 1010/2010/MODULAR ANALYTICS E170

| Roche Diagnostics GmbH, D-68298 Mannheim l

抗甲状腺过氧化物酶抗体

用途：

用免疫学方法定量测定人血清或血浆中抗甲状腺过氧化物酶抗体。电化学发光免疫测定试剂，适用于罗氏Elecsys1010、2010和E170（Elecsys模块）免疫测定分析仪。测定抗甲状腺特异性过氧化物酶抗体（anti thyroid peroxidase,anti－TPO）有助于诊断自身免疫性甲状腺病。

概述:

甲状腺过氧化物酶（TPO）存在于甲状腺细胞的微粒体中，并表达在细胞的表面。该酶与甲状腺球蛋白（Tg）协同作用将L-酪氨酸碘化，并将一碘酪氨酸和二碘酪氨酸联接成为甲状腺激素T4、T3 和rT3。TPO是一潜在的自身抗原。自身免疫性疾病引起的数种甲状腺炎常伴有

血中TPO抗体滴度升高。目前仍可经常见到的\"抗微粒体抗体\"这一名词，从临床角度看，可认为是抗TPO抗体的同义词，因为TPO抗原发现较晚。但是检测方法不同，两者还是有区别的。尽管两种方法在临床诊断敏感性上可以相比较，但由于抗TPO抗体试验采用纯化的过氧化

物酶作为抗原，所以在批间的重复性、临床特异性方面均优于抗\"微粒体抗体\"试验。抗TPO抗体滴度升高可见于90%的慢性桥本甲状腺炎以及70%的突眼性甲状腺肿患者。本试验与其他抗甲状腺抗体测定方法，如抗-TG、抗TSH受体抗体同时测定可提高敏感性，但阴性不能排除自身免疫病的可能性。高滴度抗体与疾病的程度无关系。随着病程的延长或是缓解期，抗体滴度可转阴。如在疾病的缓解期再度出现抗体，即有恶化的可能。

原理：

采用竞争法原理，整个过程18分钟完成。

· 第1步：20 µl 标本与钌（Ru）标记的抗TPO抗体混匀。

· 第2步：加入生物素化的TPO和链霉亲和素包被的微粒，标本中的抗TPO抗体与钌（Ru）标记的抗TPO抗体竞争生物素化的TPO抗原上的结合部位。形成的复合物通过生物素、链酶亲和素之间的反应结合到微粒上。

· 第3步：反应混和液吸到测量池中，微粒通过磁铁吸附到电极上，未结合的物质被清洗液洗去，电极加电压后产生化学发光，通过光电倍增管进行测定。

·检测结果由机器自动从标准曲线上查出。此曲线由仪器通过2点定标校正，由从试剂条形码扫描入仪器的原版标准曲线而得。

试剂：

M：链霉亲和素包被的微粒（透明瓶盖），1瓶，6.5ml。粒子浓度0.72g/ml，生物素结合能力： 470ng生物素/mg粒子。含防腐剂。

R1：Ru(bpy)32＋标记的羊抗TPO抗体（灰盖），1瓶，10ml。浓度1.0mg/l，TRIS缓冲液0.1mol/l，pH7.2。含防腐剂。

R2：生物素化的TPO重组抗原（黑盖），1瓶，10ml。浓度0.15mg/l，TRIS缓冲液0.03mol/l，pH7.0。含防腐剂。

Cal1：羊抗TPO定标液1(白盖),1瓶,1.3ml。浓度约35 IU/ml，人血清基质。含防腐剂。

Cal2：羊抗TPO定标液2(白盖),1瓶,1.3ml。浓度约350IU/ml，人血清基质。含防腐剂。

PC ATPO1 PreciControl 人抗TPO质控品1，（黑盖），1瓶，1.0ml。浓度约20IU/ml，人血清基质。含防腐剂。

PC ATPO2 PreciControl 人抗TPO质控品2，（黑盖），1瓶，1.0ml。浓度约100IU/ml，人血清基质。含防腐剂。

定标液和质控液的含量与浓度范围随批而定，具体值标在定标液和质控血清瓶的条形码中以Anti-thyroid peroxidase antibody Elecsys® Systems 1010/2010/MODULAR ANALYTICS E170

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及质控卡的条形码中。

储存和稳定性：

存放在2－8度，¬切莫倒置。

未开封，可稳定至标明的保质期。

开封后，2－8度， 6周；放在Elecsys2010或E170上，2周；

放在Elecsys1010上，1周（使用后放回2－8度，如置20－25度，累计约20小时）。

Cal1, Cal2: 开封后，2 －8度6周；放在仪器上，5小时。

PC ATPO 1, PC ATPO 2: 开封后，2 －8度6周；放在仪器上，5小时。

注意：不要冻存定标液和质控液。

标本采集和准备：

血清：按标准常规方法采集。

血浆：肝素、EDTA-K3 、枸橼酸钠、氟化钠/草酸-K抗凝均可。标本在2－8度可稳定3天，-20度至少可稳定1个月。只能冻融一次。含沉淀的标本使用前需离心。

不要加热灭活标本。标本和质控液禁用叠氮钠防腐。

方法：

按仪器操作说明进行操作。检查试剂与消耗品是否充足。使用前需混匀微粒。仪器通过扫描试剂盒条形码自动输入测试所需的特异性参数，不需手工输入。如果特殊情况下仪器无法阅读条形码，可以手工输入15位数字。

Elecsys2010和E170：将冷藏试剂预温到20度后放置于仪器的试剂盘上，避免产生泡沫。仪器自动控制试剂温度和开/关试剂瓶盖。

Elecsys1010：将冷藏试剂预温到20-25 度后放置于仪器的样品/试剂盘上（室温20-25度），避免产生泡沫。使用前手工打开试剂瓶盖，使用后手工关闭试剂瓶盖并放回2－8度。

将Cal1、Cal2放在仪器的标本区。仅在定标时打开盖子。定标液瓶上的条型码含有定标所需的信息，由仪器自动读入。定标后将Cal1 ，Cal2放回2-8度。

将PC A-TPO1，PC A-TPO2放在仪器的标本区。仪器能自动读入质控血清瓶条形码所含有的信息。分析完成后放回2-8 度。

定标：

每批抗-TPO试剂有一条形码标签，含有该批试剂定标所需的特殊信息。应用Cal1，Cal2定标液定标。

定标频率：

· 每一试剂盒做一次

重新定标：

每日定标：使用同一试剂盒（Elecsys1010的平衡温度：20－32度）

各分析仪均适用的情况：

·根据要求进行标定：如质控结果超出范围时。

质控：

PreciControl抗-TPO1和抗-TPO2以及其它合适的质控品。各浓度区域的质控至少每24工作时、每个试剂盒或每一次定标后测定一次。质控间隔期应适用于各实验室的具体要求。检测值应落在确定的范围内，如出现质控值落在范围以外，应采取校正措施。

计算：

Anti-thyroid peroxidase antibody Elecsys® Systems 1010/2010/MODULAR ANALYTICS E170

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抗甲状腺过氧化物酶抗体

对每一个标本，仪器会自动计算抗-TPO含量。单位是IU/ml或KIU/l。

干扰因素：

该方法不受黄疸（胆红素<66mg/dl）、溶血（血红蛋白<1.5g/dl）、脂血（脂质<2100mg/dl）和生物素<60ng/ml等干扰。接受高剂量生物素（>5mg/天）治疗的病人，至少要等最后一次摄入生物素8小时后才能采血。不受类风湿因子干扰（1500U/ml）。23种常用药物经试验对本测定无干扰。偶尔会遇到抗链酶亲和素抗体以及其它免疫反应的干扰。

检测范围：

5─600 IU/ml 。

稀释：

高于检测范围的标本可用通用稀释液稀释。建议1:5稀释。稀释后的标本抗-TPO含量必须高于200IU/ml。如用手工稀释，结果应乘上稀释倍数。如果是机器自动稀释，机器会自动计算结果。注意：自身抗体是异源性的，对于一些标本，抗体滴度与稀释不成比例。

正常参考值：

34 IU/ml （95%，n=208）

Elecsys抗－TPO测定结果应结合病人病史、临床其他检查结果综合起如有必要，各实验室应自己测定一个正常值范围。