医学论文之 实验研究 (10)

密骨颗粒对小鼠骨质疏松症的防治作用

作者：陈立军， 余 黎 作者单位：(1.南京中医药大学基础医学院,江苏 南京 210046;2.南京中医药大学国家规范化中药药理实验室,江苏 南京 210029)

【摘要】 目的 研究密骨颗粒对骨质疏松症的防治作用。方法 采用雄性小鼠去势和肌注地塞米松复合骨质疏松症模型。取股骨测骨密度并做病理检测。结果 密骨颗粒能增强骨质疏松症模型小鼠骨密度，中剂量组和模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。病理检测表明，密骨颗粒能改善模型小鼠骨小梁结构，大剂量组改善明显，未见骨小梁缺损和破坏。结论 密骨颗粒对骨质疏松症有较好的防治作用。

【关键词】 密骨颗粒; 骨质疏松症; 骨密度; 病理变化; 小鼠

Preventive and therapeutic effects of Migu granule on osteoporosis in mice CHEN Lijun1,YU Li2 (1.Preclinical Medicine College, Nanjing University of Traditional Chinese Medicine, Nanjing 210046, China; 2. National Standard Laboratory of Pharmacology for Chinese Meteria Medica, Nanjing University of Traditional Chinese Medicine, Nanjing 210029, China) 【Abstract】 Objective To study the preventive and therapeutic effects of Migu granule on osteoporosis. Methods The pathological model of osteoporosis in mice was induced by wholly cutting away testicles and injecting dexamethasone. The bone mineral density of right thighbone was measured, and the right thighbone's pathological changes were observed too. Results Migu granule could augment the bone mineral density of the mice. The middle dose group had remarkable improvement compared with model group (P<0.05). Migu granule could also improve the structure of bone trabecula. The high dose group improved remarkably as the defect and lesion of bone trabecula were not observed. Conclusion Migu granule has preventive and therapeutic effects on osteoporosis in mice.

【Key words】 Migu granule;osteoporosis;bone mineral density;pathological changes;mice 密骨颗粒是由本室自行研制的中药制剂，其组方是在二仙汤的基础上加减化裁而成，具补肾壮骨的功效，用于治疗骨质疏松症。本实验用雄性小鼠去势和肌注地塞米松复合骨质疏松症模型[1]，观察了密骨颗粒对骨质疏松症的防治作用。 1 材料与方法 1.1 药品及试剂

密骨颗粒(Migu granule，MG);钙尔奇(Calrtate)DR600片剂，惠氏百宫制药有限公司，批号：0210116;地塞米松磷酸钠，金陵药业股份有限公司南京金陵制药厂，批号：021204. 1.2 动物

ICR小鼠100只，雄性，SPF级，南京医科大学实验动物中心提供，合格证号：SCXK(苏)2002003. 1.3 仪器

骨密度测定仪(Piximus bone densitometer)，美国General Electronic Lunar公司。 1.4 动物处理

将小鼠按体重随机分为6组，除正常对照组15只外，其余各组均为17只。分组后的第2 d，称重，腹腔注射0.1%戊巴比妥钠(0.1 ml/10 g)麻醉，手术野常规消毒后摘除睾丸，止血钳夹闭，不缝合。手术后腹腔注射环丙沙星(0.1 ml/10 g)，连续3 d，手术7 d后给药。除正常对照组外，其余各组均每周肌注地塞米松2次，每次0.1 ml(0.01 mg/10 g)。密骨颗粒及阳性对照组每天灌胃给药1次，模型组和阴性对照组每天灌胃予生理盐水，0.2 ml/10 g，连续

3个月。密骨颗粒分大、中、小3个剂量组，分别为5.12 g生药/10 g、1.71 g生药/10 g、0.57 g生药/10 g，阳性对照组予钙尔奇0.42 g/10 g. 给药3个月后处死小鼠，取右侧股骨测骨密度后以10%甲醛溶液固定，做病理检测。 1.5 病理检测

取成年雄性昆明小鼠股骨胫骨端骨松质为观察对象，均为右侧下肢。分6组，每组10只。小鼠股骨取下后剔除肌肉，用10%的室温固定1周。然后用40%的甲酸室温脱钙2 d，用化学方法检测脱钙结果，确定脱尽后，取胫骨端纵向剖开，按骨的常规石蜡切片制样方法进行包埋、切片，片厚5 ?m，常规HE染色，最后镜检并选定骺线下方视野为固定视野进行摄片。 1.6 统计学处理

采用SPSS 13.0统计软件进行数据分析，数据以±s表示。采用t检验，P<0.05为差异有统计学意义。 2 结果

2.1 密骨颗粒对骨质疏松症模型小鼠骨密度的影响 如表1所示，密骨颗粒能增强骨质疏松症模型小鼠骨密度，中剂量组和模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。阳性组和模型组比较差异也有统计学意义(P<0.05)，但和密骨颗粒组差异不显著。 2.2 病理检测 观察显示，正常对照组各小鼠股骨胫骨端骨小梁分布广泛，充满胫骨干垢端直至与骨干交界处。骨小梁排列以纵向为主，纵向的骨小梁之间有横向的骨小梁连接，互相连接成立体网状结构，网眼即为骨髓腔。骨小梁较宽，分布密集，未见骨小梁缺损和破坏。骨髓腔中的骨髓细胞密集分布于骨髓腔中，可见骨髓细胞间有少量脂肪或空白区域存在(见图1)。模型组骨小梁分布区域明显减少，只占骺线下方很小的区域。骨小梁排列稀疏，直径变细，骨髓腔因之显得较空旷。有的地方骨小梁变细变尖、终于断裂，使网状结构遭到破坏、缺损。骨髓腔中骨髓细胞间可见大量脂肪存在(见图2)。钙尔奇组骨小梁分布较模型组广泛，宽度比模型组宽，网状结构基本完整，骨小梁缺损和破坏不多见。骨髓腔中骨髓细胞旁仍有较多脂肪脂滴存在(见图3)。密骨颗粒大剂量组骨小梁分布较广泛，同空白组的范围相当。骨小梁宽度比较宽。网状结构完整，骨小梁和骨小梁之间连接处粗大牢固，未见骨小梁缺损和破坏。骨髓腔中的骨髓细胞间仍有较多脂肪脂滴存在(见图4)。中剂量组骨小梁的分布、数量、宽度改善不如大剂量组，骨髓腔中的骨髓细胞间仍有较多脂肪脂滴(见图5)。小剂量组与模型组相比，在骨小梁的数量和宽度上改善不明显(见图6)。表1 密骨颗粒对骨质疏松症模型小鼠骨密度的影响 3 讨论

骨质疏松症是以骨量减少为特征、骨组织显微结构改变、骨折危险频度增加的一种系统性骨骼疾病。目前其发病机理尚不完全清楚，临床治疗亦面临一定的困难。中医典籍中并无骨质疏松症病名的记载，其临床表现颇类似于古籍中的\"骨痿\"、\"骨枯\"、\"腰痛\"、\"痹证\"、\"骨痛\"等证。中医认为骨质疏松的发生主要是由肾虚所致，因而补肾是其治疗大法[2]。补肾疗法可以纠正免疫系统的功能低下，恢复下丘脑垂体性腺轴的功能活动，抑制骨吸收，加快骨形成，延缓骨量丢失，提高骨矿含量，调节体内微量元素的平衡，改善骨的内部结构等, 从而防治骨质疏松[3,4]。二仙汤以淫洋藿、仙茅等补肾中药为主，是临床治疗骨质疏松症的有效方剂[5]，研究表明其能延缓老年前期大鼠性腺轴的衰老[6]。而去势和大剂量糖皮

质激素造成的骨质疏松模型均属肾虚模型[7]。从我们的实验结果来看，雄性小鼠去势和肌注地塞米松复合骨质疏松模型是成功的，模型组骨密度和正常对照组比较差异有统计学意义，病理检测结果亦表明造模是成功的。而密骨颗粒能增强骨质疏松小鼠骨密度，中剂量组和模型组比较差异有统计学意义。病理观察表明，密骨颗粒能改善小鼠骨小梁结构，大剂量组改善明显，未见骨小梁缺损和破坏。因而，密骨颗粒能改善骨质疏松症小鼠的病变，是防治骨质疏松症颇有前景的中药复方制剂，推测其主要作用机制可能是改善下丘脑垂体性腺轴的功能。 【参考文献】

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