２０１６年ｌ２月第１７期 １４９ 复方五倍子有效成分的分离鉴定 黎桂燕 （梧州市中医院广西梧州５４３００２） 摘要：目的：对复方五倍子有效成分的分离鉴定。方法：使用薄层析硅胶ＧＦ２．５４制板，利用展开荆和氨熏一三氯化铁显色，观察层析情况。 结果：复方五倍子的有效成分为鞣质、没食子酸、槲皮素、黄芩苷、芦荟大黄素，其中没食子酸的含量最大。另外发现有效成分抑茵活性顺序为 没食子酸、蒽醌、黄芩苷、槲皮素、鞣质。结论：不同药液的配对显示出不同作用，为复方五倍子抗茵剂组方的合理性提供了参考。 关键词：复方五倍子；有效成分；分离鉴定 中图分类号：Ｒ２８４．２ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００６—０９７９（２０１６）１７－０１４９—０１ 临床中关于中草药的研究越来越多。特别是我国水产养殖规模 ２．２各有效成分的联合用药情况分析研究发现，没食子酸与葸醌、黄 不断扩大的当下，由于各种因素的影响导致养殖环境的不断恶化，水 芩苷、槲皮素分别有协同、累加、累加的作用，葸醌与黄芩苷有累加作 产养殖的发病率越来越高。由于鱼类细菌性疾病发病快，感染率高， 用。见表２。 十分容易造成鱼类的死亡。以往针对鱼类疾病主要是采用抗菌化学 表２各有效成分的联合用药情况分析 类药物，虽然能够解决一些问题但是也给养殖环境和水产品质量带来 了隐患。相关研究显示，五倍子具有良好的抑菌作用…。介于此，本 文对五倍子的有效成分进行分离鉴定，现具体报道如下。 １材料与方法 １．１材料中药材：五倍子、大黄、黄芩、没食子酸、１，８一二羟基葸醌、大 黄素、芦荟大黄素、黄芩苷、槲皮素等。试验菌种：柱状黄杆菌、温和气 ３讨论 单胞菌、豚鼠气单胞菌、迟缓爱德华菌。 越来越多的药理学研究表明，单味中药在抑制鱼类疾病方面有独 １．２方法制备样品液：进行总有效成分样品液、各单体成分样品液、菌 特的效果 。五倍子作为一种囊状虫瘿，其主要成分是鞣质以及没食 液的制备。进行复方有效成分的分析：将之前制备的各单体成分样品 子酸等。鞣质作为五倍子的主要成分，含量可以达到６ｏ％一７０％，属 液进行薄层分析，了解复方样品Ｒ值是否有新物质的产生与消失。 于一种结构比较复杂的多酚类化合物，在酸性条件下鞣质可以水解成 取复方提取液进行薄层分析，对比复方中各样品点和标准品Ｒ值确 为没食子酸，而没食子酸鞲具有抑菌、抗病毒、清除自由基等作用。但 定样品成分。首先进行薄板的制备，然后完成点样、层析、显色。进行 是在本次研究中，发现鞣质的抑菌作用直径为零，这一点结果可能提 柱层析分离复方有效成分，包括样品制备、装柱、上样、洗脱、收集。进 示五倍子的水解鞣质并无抑菌作用。从中药的药理活性进行分析发 行各个成分的抑菌试验：使用无菌棉签将浓度为１．５亿／ＩＩＩｌ的温和气 现，其有效成分是决定其药理活性的关键，本次研究显示复方五倍子 单胞菌、豚鼠气单胞菌、迟缓爱德华菌液全部均匀的涂抹在普通固体 抗菌剂的有效成分分别为鞣质、没食子酸、槲皮素、黄芩苷、芦荟大黄 培养基上，将柱状屈挠杆菌均匀的涂抹在固体胰胨培养基上，使用直 素等。有相关研究发现，五倍子乙醇提取物对金黄色葡萄球菌具有较 径为６ｍｍ的无菌圆形玻璃管打孔，吸取３Ｏ 注入孔中，然后将其放 强的抑菌活性。在复方五倍子中，其他的主要有效成分是槲皮素和黄 置在３７℃恒温箱中培养２４ｈ，达到规定时间将其取出使用卡尺测量抑 芩苷，通过对槲皮素的研究发现，槲皮素的ＭＩＣ值在０．３２５—０．２５ｉａｇ／ 菌圈的直径，为保证结果的准确性，重复测量５次取平均值。进行联 ＩｎＩ之间。有相关研究发现，松萝酸和槲皮素联合使用时对表皮葡萄 合药敏试验：使用无菌棉签将浓度为１．５亿／ｎｌｌ的温和气单胞菌液均 球菌具有协同抑制作用，而对金黄色葡萄球菌、变形链球菌等有相加 匀的涂抹在普通固体培养基上，然后使用直径为６ｍｍ的无菌圆形玻 抑制作用。还有研究发现两药合用之后其抑菌作用比单一使用药物 璃管打孔在固定培养基上，同样注入３０ 对应药液。将其放置在 要更加明显 ｊ，本次研究中没食子酸与蒽醌联合产生协同作用，没食 ３７℃恒温箱中培养２４ｈ，达到规定时间后将其取出观察联合用药之后 子酸与黄芪干、槲皮素产生累加作用，蒽醌与黄芩苷产生累加作用，并 抑菌环交界处形状。 无拮抗作用的发生。有研究显示黄芩苷能够减轻金黄色葡萄球菌外 １．３观察指标：对比分析五倍子抗菌剂各有效成分的抑菌作用。协同 毒素诱发的病理损害可能是通过阻断细胞的信号通讯通路而发挥 作用川。 作用：两药抑菌交界区平直；累加作用：两药抑菌交界区钝角；无关作 用：两药抑茵交界角尖锐；拮抗作用：两药抑茵区交界呈切割状。 本次研究结果显示，复方五倍子的有效成分为鞣质、没食子酸、槲 ２结果 皮素、黄芩苷、芦荟大黄素，其中没食子酸的含量最大。另外发现有效 ２．１五倍子抗菌剂各有效成分的抑菌作用分析通过研究发现，迟缓爱 成分抑菌活性顺序为没食子酸、蒽醌、黄芩苷、槲皮素、鞣质。 德华菌最敏感，豚鼠气单胞菌的耐药性最强，而没食子酸的抑菌活性 综上所述，不同药液的配对显示出不同作用，为复方五倍子抗菌 最强，鞣质未出现抑菌环。见表１。 荆组方的合理性提供了参考。 衰１复方五倍子备有效成分的抗菌作用分析ｆ衄） 参考文献 ［１］郑曙明，黄建军，昊青，等．复方五倍子有效成分的分离鉴定及抑 茵活性研究［Ｊ］．水生生物学报，２０１０，２３（１）：５７—６４． ［２］张雅丽，李建科，刘柳，等．五倍子没食子酸研究进展［Ｊ］．食品工 业科技，２０１３，２９（１０）：３８６—３９０． ［３］杨义芳．中药有效成分提取分离新技术的研究进展［Ｊ］．亚太传 统医药，２００８，２９（７）：２９～３４． ［４］李忠琴，关瑞章，汪黎虹，等．六种中药及其复方对鳗鲡致病性气 单胞茵的体外抑制作用［Ｊ］．水生生物学报，２０１２，３３（１）：８５—９２． 作者简介：黎桂燕（１９６３年７月一），性别：女，民族：汉族，籍贯：广西省梧州 ２０１６年１１月１日收稿 市；职称：主管药师