第４４卷第６期 当 代 化 工 ＶＯ］．４４．ＮＯ．６ ２０１ ５年６月 Ｃｏｎｔｅｍｐｏｒａｒｙ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｉｎｄｕｓｔｒｙ Ｊｕｎｅ．２０１ ５ 对氨基苯甲酰胺中对氨基苯甲酸含量的测定 王丰莉，聂和俊，熊永科，陈伟强 （百合花集团股份有限公司，浙江杭州３１１２２８） 摘 要：运用薄层色谱、紫外光谱、红外光谱对对氨基苯甲酰胺中对氨基苯甲酸进行定性确认。通过条件 试验确定ＨＰＬＣ最佳分离条件，用乙酸铵调节缓冲体系，用２０％（Ｖ／Ｖ）的甲醇作为流动相，外标法定量。对 氨基苯甲酸含量在０％～０．２８％之间具有线性关系。验证试验表明方法简单、可行。可满足对氨基苯甲酰胺中对 氨基苯甲酸含量的测定。 关键词：对氨基苯甲酰胺；对氨基苯甲酸；高效液相色谱 中图分类号：Ｏ ６５７ 文献标识码：Ａ 文章编号： １６７１－０４６０（２０１５）０６—１４３５—０３ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ４－Ａｍｉｎｏｂｅｎｚｏｉｃ Ａｃｉｄ ｉｎ Ｐ—Ａｍｉｎｏ－Ｂｅｎｚａｍｉｄｅ ＷＡＮＧ Ｆｅｎｇ－ｌｉ，ＮＩＥＨｅ－ｊｕｎ，ＸＩＯＮＧ Ｙｏｎｇ－ｋｅ，ＣＨＥＮ Ｗｅｉ—ｑｉａｎｇ （Ｌｉｌｙ Ｇｒｏｕｐ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．，Ｚｈｅｊｉａｎｇ Ｈａｎｇｚｈｏｕ ３１１２２８，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＴＬＣ＼ＵＶ＼ＩＲ ｗｅｒｅ ｕｓｅｄ ｔｏ ｐｒｏｖｅ ｔｈｅ ｅｘｉｓｔｅｎｃｅ ｏｆ ４一ａｍｉｎｏｂｅｎｚｏｉｃ ａｃｉｄ ｉｎ ｐ－ａｍｉｎｏ—ｂｅｎｚａｍｉｄｅ．Ｔｈｅ ｓｅｐａｒａｔｉｎｇ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｗｅｒｅ ｄｅｃｉｄｅｄ ｂｙ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｔｅｓｔｓ．Ｔｈｅ ｐＨ ｏｆ ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ ｗａｓ ａｄｊｕｓｔｅｄ ｂｙ ａｍｍｏｎｉｕｍ ａｃｅｔａｔｅ，ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ ｗａｓ ｍｅｔｈａｎｏ１ ２０％ｆＶ，Ｖ１．Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｗａｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｂｙ ｅｘｔｅｒｎａｌ ｓｔａｎｄａｒｄ ｍｅｔｈｏｄ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗ ｔｈａｔ ４一ａｍｉｎｏｂｅｎｚｏｉｃ ａｃｉｄ（０％～０．２８％１ ｉｎ Ｐ．ａｍｉｎｏ．ｂｅｎｚａｍｉｄｅ ｃａｎ ｂｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｂｙ ｔｈｉｓ ｍｅｔｈｏｄ．Ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｉＳ ｓｉｍｐｌｅ， ｒａｐｉｄ．ａｃｃｕｒａｔｅ ａｎｄ ｃａｎ ｍｅｅｔ ｔｈｅ ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔ ｆｏｒ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ４一ａｍｉｎｏｂｅｎｚｏｉｃ ａｃｉｄ ｉｎ Ｐ—ａｍｉｎｏ—ｂｅｎｚａｍｉｄｅ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｐ．ａｍｉｎｏ．ｂｅｎｚａｍｉｄｅ；４一ａｍｉｎｏｂｅｎｚｏｉｃ ａｃｉｄ；ＨＰＬＣ 对氨基苯甲酰胺（ＤＢ一７０）即红色基ＤＢ一７０， （以下以ＤＢ一７０表示）是重要的有机颜料中间体， ｌ实验部分 是颜料红１７０的主要原材料…。ＤＢ一７０通常以对硝 １．１仪器与试剂 基苯甲酸为原料，经过酰氯化、氨解、还原反应制 １．１．１试剂 成 。对氨基苯甲酸易在氨解过程产生，它能够与 ＤＢ一７０（工业样品）；对氨基苯甲酸标准品；甲 ＤＢ一７０一起重氮化，与偶合组分偶合生成有色物质， 醇（色谱纯）；乙酸铵、异丙醇、甲苯、氨水、亚硝 对颜料的纯度、颜色性能甚至应用性能等产生影响。 酸钠、盐酸、Ｎ一（１一萘基）一二氯乙二胺均为分析纯试 并且其本身为双官能团化合物，也可以与芳胺类偶 剂；ＧＦ２５４薄层硅胶板（制备板）。 合，生成偶氮染料ｐ 和偶氮颜料 Ｉ。因此测定其中对 １．１．２仪器 氨基苯甲酸的含量对生产应用具有重要意义。 三用紫外分析仪（ＺＦ一２）；真空泵（ＡＰ一９９２５）；超 ＤＢ一７０中对氨基苯甲酸含量通常用薄层色谱法 声波清洗器（ＫＵＤＯＳ）；红外光谱仪（ＰＥ ＳＰＥＣＴＲＵ 测定。该法萃取及分离时间较长，显色需经过重氮 ＴＷＯ）；高效液相色谱仪（ＬＣ一２０ＡＤ，ＤＡＤ检测器， ＯＤＳ Ｃ１８柱，５ ｕｍ Ｘ ４．６ ｍｍ Ｘ ２５０ ｍｍ）。 化、偶合反应，容易产生有毒氮氧类气体；并且使 用高浓度的酸，产生酸雾，对测试环境及操作者造 １．２试验方法 １．２．１定性试验 成不良影响。依靠斑点的大小及颜色的深浅判定含 用ＴＬＣ方法把ＤＢ一７０中主杂质进行分离，通 量，量化准确度较差。 过显色找出待测杂质位置。用硅胶制备板分离出对 化妆品中的对氨基苯甲酸类物质色谱法测定已 氨基苯甲酸，制取试验溶液。同样方法配制对氨基 有报道 。本文把高效液相色谱法应用于ＤＢ一７０中 苯甲酸标准品，作为标准溶液。 对氨基苯甲酸的测定，用外标法进行定量。测试快 对试验溶液和标准溶液分别用ＨＰＬＣ和ＩＲ测 速、结果准确，过程安全，环保。 试。通过ＨＰＬＣ出峰位置，及对应位置峰提取的ｕｖ 收稿日期：２０１ ５－０１－０５ 作者简介： 王丰莉（１９８１一），女，河南南阳人，工程师，硕士，２００６年毕业于中南民族大学分析化学专业，研究方向：颜料及中间体中杂质的 测定与分离。Ｅ－ｍａｉｌ：ｗｆｌ＠ｌｉｌｙｇｒｏｕｐ．ｃｎ。 化 工 ２０１ ５年６月 图，以及ＩＲ图来确定试验溶液的成分。 １．２．２定量试验 川 ２．１．３ ＩＲ测试结果 ㈣ 用液膜法，在４ ０００～４５０ ｃｍ 对试验溶液进行 ０ 通过条件试验优化流动相组成，选取最佳分离 条件。 称取０．５ ｇ样品，用甲醇溶解并定容到５０ｍＬ， 作为样品溶液。在选定的ＨＰＬＣ分离条件进行测定。 以对氨基苯甲酸标准品配制标准溶液，用外标法， 用峰面积计算其含量。 ２结果和讨论 ２．１谱图定性分析 ２．１．１ ＨＰＬＣ图ｆ图１） Ｕ ０ １０ ２．０ ｊ．Ｌ， ４【ｊ ，０ ｎ．０ ／Ｉｈｎｉｌｌ 图１标准溶液ＨＰＬＣ图 Ｆｉｇ．１ ＨＰＬＣ ｓｐｅｃｔｒｕｍ ｏｆ ｓｔａｎｄａｒｄ ｓａｍｐｌｅ 图２中，试验溶液在～４．１ ｍｉｎ出峰（其中～６．２ ａｒｉｎ的微量峰为ＤＢ一７０），与图１中对氨基苯甲酸标 准品出峰位置吻合。 图２试验溶液ＨＰＬＣ图 Ｆｉｇ．２ ＨＰＬＣ ｓｐｅｃｔｒｕｍ ｏｆ ｓａｍｐｌｅ ２．１．２ ＵＶ吸收结果 分别提取图１、图２及图３中～４．１ ｒａｉｎ处峰对 应的ｕＶ图，其紫外吸收相同，最大吸收波长均为 ２６５ ｎｍ。斑点位置的杂质与对氨基苯甲酸标准品的 紫外吸收一致。 扫描。结果显示，特征峰位置（ｃｍ ）：３ ４６０；３ ３９０； ３ ３６０；１ ６６０－１ ５７５；１ ３５５；１ １８０；８４５，与对氨基 苯甲酸特征峰匹配。 综合２．１．１、２．１．２、２．１－３，可以判定ＤＢ一７０中 主杂质为对氨基苯甲酸。 ２．２ ＤＢ一７０中对氨基苯甲酸含量的测定 图３为车间生产的ＤＢ一７０工业品的ＨＰＬＣ图。 对氨基苯甲酸含量以～４．１ ｍｉｎ峰的峰面积，用外标 法测定。 图３ ＤＢ－７０的ＨＰＬＣ图 Ｆｉｇ．３ ＨＰＬＣ ｓｐｅｃｔｒｕｍ ｏｆ Ｐ－ａｍｉｎｏ—ｂｅｎｚａｍｉｄｅ ２．２．１色谱条件的选择 在现有仪器条件，通过对流动相的选择优化分 离条件。 考虑到ＤＢ一７０及对氨基苯甲酸结构中含有路 易斯酸碱基团，向流动相中加入缓冲盐调节其ｐＨ 值，使被测物质以单一的形态存在于体系中。本研 究中选择乙酸铵进行调节。 在Ｃ１８反相色谱中，流动相中有机成分比例对 大多数待测组分的保留行为影响较大。３０％（Ｖ／Ｖ） 甲醇作流动相，ＤＢ一７０与对氨基苯甲酸重叠。而１０％ （Ｖ厂ｖ）甲醇体系中，分离效果较好，但出峰较慢， 甚至部分其它杂质成分不能洗出。考虑分离效果及 操作时间，选定２０％（Ｖ／Ｖ）比例的有机相组成。 ｕｖ图显示，该体系中对氨基苯甲酸的最大吸 收波长为２６５ ｎｍ，ＤＢ一７０的最大吸收波长２７１ ｎｍ， 综合其它杂质成分的紫外吸收特性，选定２７０ ｎｍ作 为定量的波长。 最终确定测试的色谱条件为： 柱温箱：３５ ｃｃ 流速：０．８ ｍＬ／ｍｉｎ 流动相：（甲醇：０．２％乙酸铵溶液＝２０：８０，Ｖ／Ｖ） ＨＰＬＣ图提取波长：２７０ Ｉｌｍ。 第４４卷第６期 王丰莉，等：对氨基苯甲酰胺中对氨基苯甲酸的测定 １４３７ ２．２．２测量范围的确定 ２．２．３可行性试验 以对氨基苯甲酸的线性范围作为测量范围选择 同时对５个不同生产批次和１个对照品批次的 的依据。 的ＤＢ一７０样品中对氨基苯甲酸进行薄层显色评级 图４中，对氨基苯甲酸含量在０～２ ８００ ｍｇ／ｋｇ， 和本法测定含量进行比较（表１）。 即不超过０．２８％范围内，相关系数达到０．９９９ １，有 表１中ＴＬＣ评级与测出的对氨基苯甲酸含量高 很好的线性关系，能满足工业ＤＢ一７０中对氨基苯甲 低相对应，说明该法测定可行。 酸含量测定的需求。 ８００００００ ３结束语 ７０Ｏ０００ ０ 通过标准物质对照，借助ｕＶ、ＨＰＬＣ、ＩＲ手段 ６０００００（） 确定待测组分为对氨基苯甲酸。用乙酸铵调节流动 ５００（）００ｆ） 相的ｐＨ值，以２０％（Ｖ／ｖ）的甲醇作流动相，能够 ４０００００ ０ 使ＤＢ一７０中的杂质完好分离。用峰面积进行定量， ３００００００ 可以快速准确的测定其中对氨基苯甲酸的含量，该 ２００００００ 法也可推广运用于ＤＢ一７０中其它杂质成分的测定。 Ｉ１）ｆ）０Ｏ００ 本研究中使用的ＨＰＬＣ使用的ＤＡＤ检测器，可 （） 以用ｕＶ检测器，固定检测波长进行测定。测试中 使用的其它试剂、仪器等也比较大众化，宜于测定 图４对氨基苯甲酸线性范围 Ｆｉｇ．４ Ｌｉｎｅａｒ ｒａｎｇｅ ｏｆ ４一ａｍｉｎｏｂｅｎｚｏｉｃ ａｃｉｄ 方法的推广。 表１可行性试验 参考文献： Ｔａｂｌｅ １ Ｆｅａｓｉｂｉｌｉｔｙ 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