２０５８－－——— Ｃｈｉｎ Ｊ Ｌａｂ Ｄｉａｇｎ，Ｄｅｃｅｍｂｅｒ，２０１６，Ｖｏｌ ２０，Ｎｏ．１２ 文章编号：１００７—４２８７（２０１６）１２—２０５８—０４ 头孢吡肟敏感性低于头孢他啶阴沟肠 杆菌的耐药基因研究 余建洪，曾章锐，刘 恋，张开炯，李宝林，刘靳波 （西南医科大学附属医院检验科，四ＪＩＩ泸州６４６０Ｏ０） 摘要：目的研究临床分离的阴沟肠杆菌对头孢吡肟（ＦＥＰ）敏感性低于头孢他啶（ｃＡｚ）的耐药基因，为医院感染 控制提供参考。方法收集临床分离的经琼脂稀释法证实的头孢吡肟（ＰＥＰ）敏感性低于ＣＡＺ的阴沟肠杆菌菌株８ 株，采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增细菌耐药基因。耐药基因水平传播采用质粒接合试验。结果 ８株菌株中有３株 耐药基因ＯＸＡ－１和ＯＸＡ－３１同时阳性，２株耐药基因ＯＸＡ－１０和ＯＸＡ－３５同时阳性，且以上基因在菌株质粒中均扩增 阳性，但仅２株接合成功，而耐药基因ＰＳＥ一１全部阴性。结论耐药基因ＯＸＡ１、ＯＸＡ１０、ＯＸＡ３１和ＯＸＡ３５是导致 阴沟肠杆菌对头孢吡肟敏感性低于头孢他啶的重要机制之一，有通过质粒介导进行传播的风险，应采取措施防止其 爆发流行。 关键词：阴沟肠杆菌；头孢吡肟；头孢他啶；耐药机制；聚合酶链反应 中图分类号：Ｒ３７８．２ 文献标识码：Ａ Ｓｔｕｄｙ ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｇｅｎｅｓ ｏｆ ｌｓｅｓ ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ ｔｏ ｃｅｆｅｐｉｍｅ ｔｈａｎ ｔｏ ｃｅｆｔａｚｉｄｉｍｅ ｉｎ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｉｓｏｌａｔｅｓ ｏｆ Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ ｃｌｏａｃａｅ ＹＵ Ｊ Ｊａｎ—ｈｏｎｇ，ＺＥＮＧ Ｚｈａｎｇ—ｒｕｉ，ＬＩＵ Ｌｉａｎ，ｅｔ ａ１．（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｔｈｅ Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｓｏｕｔｈｗｅｓｔ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｌｕｚｈｏｕ ６４６０００，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：０ｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｓｔｕｄｙ ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｇｅｎｅｓ ｏｆ ｌｅｓｓ ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ ｔＯ ｃｅｆｅｐｉｍｅ（ＦＥＰ）ｔｈａｎ ｔｏ ｃｅｆｔａｚｉｄｍｅ（ＣＡＺ）ｉｎ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｉｓｏｌａｔｅｓ ｏｆ Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ ｃｌｏａｃａｅ，ＳＯ ａｓ ｔｏ ｐｒｏｖｉｄｅ ｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓ ｆｏｒ ｃｏｎｔｒｏｌｌｉｎｇ ｔｈｅ ｈｏｓｐｉｔａｌ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ａ ｔｏｔａｌ ｏｆ ｅｉｇｈｔ ｉｓｏｌａｔｅｓ ｏｆ Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ ｃｌｏａｃａｅ ｗｈｉｃｈ ｈａｄ ｂｅｅｎ ｃｏｎｆｉｒｍｅｄ ｂｅｉｎｇ ｌｅｓｓ ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｌｅ ｔＯ ＦＥＰ ｔｈａｎ ｔＯ ＣＡＺ ｆｏｒ ｍｉｎｉｍａｌ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ（ＭＩＣ）ｂｙ ａｇａｒ ｄｉｌｕｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ ｗｅｒｅ ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ．Ｔｈｅ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｇｅｎｅｓ ｗｅｒｅ ａｍｐｌｉｆｉｅｄ ｂｙ ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎ ｒｅａｃｔｉｏｎ（ＰＣＲ）．Ｈｏｒｉｚｏｎｔａｌ ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｇｅｎｅｓ ｗｅｒｅ ｔｅｓｔｅｄ ｂｙ Ｐｌａｓｍｉｄ ｃｏｎｊｕｇａｔｉｏｎ ｔｅｓｔ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｇｅｎｅ ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ：ＯＸＡ－１ ａｎｄ ＯＸＡ－３１ ｗｅｒｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｉｎ ｔｈｒｅｅ ｓｔｒａｉｎ ｓｉｍｕｌ— ｔａｎｅｏｕｓｌｙ。０ＸＡ一１Ｏ ａｎｄ ＯＸＡ一３５ ｗｅｒｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｉｎ ｔｗｏ ｓｔｒａｉｎ Ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｌｙ，ｂｕｔ ＰＳＢ－１ ｗａｓ ｎｏｔ ａｍｐｌｉｆｉｅｄ ｉｎ ａｌｌ ｅｉｇｈｔ ｉ— ｓｏｌａｔｅｓ．Ｔｈｅ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｇｅｎｅｓ ｉｎ ｐｌａｓｍｉｄ ＤＮＡ ｏｆ ｆｉｖｅ ａｌｌ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｇｅｎｏｍｉｃ ｓｔｒａｉｎｓ ｗｅｒｅ ａｍｐｌｉｆｉｅｄ，ｂｕｔ ｏｎｌｙ ｔｗｏ ｏｆ ｔｈｅ ｆｉｖｅ ｓｔｒａｉｎｓ ｗｅｒｅ ｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌｌｙ ｊｏｉｎｅｄ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｅ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｇｅｎｅ ｏｆ ＯＸＡ－１，ＯＸＡ一１０，ＯＸＡ一３１ ｏｒ ＯＸＡ－３５ ｗａｓ ａｎ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ。ｔｈａｔ ｒｅｓｕｌｔｅｄ ｉｎ Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ ｃｌｏａｃａｅ ｌｅｓｓ ｓｕｓｃｅｐｉｔｉｂｉｌｔｉｙ ｔＯ ＰＥＦ ｔｈａｎ ｔＯ ＣＡＺ，ａｎｄ ｈａｓ ｔｒａｎｓｍｉｓ— ｓｉｏｎ ｒｉｓｋ ｍｅｄｉａｔｅｄ ｂｙ ｐｌａｓｍｉｄ．Ｍｅａｓｕｒｅｓ ｓｈｏｕｌｄ ｂｅ ｔａｋｅｎ ｔＯ ｐｒｅｖｅｎｔ ｔｈｅ ｏｕｔｂｒｅａｋ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ ｃｌｏａｃａｅ；Ｃｅｆｅｐｉｍｅ；Ｃｅｆｔａｚｉｄｍｅ；Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ；Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎ ｒｅａｃｔｉｏｎ （Ｃｈｉｎ Ｊ Ｌａｂ Ｄｉａｇｎ，２０１６，２０：２０５８） 阴沟肠杆菌是存在于人和动物肠道内的正常菌 １材料与方法 群，为条件致病菌。由于广谱抗菌药物的大量使用 １．１ 菌株来源 收集２０１３年９月～２Ｏ１５年９月 以及患者免疫功能低下等原因，阴沟肠杆菌已成为 经ＭｉｃｒｏＳｃａｎ ＷａｌｋＡｗａｙ ９６Ｐｌｕｓ全自动微生物鉴 医院感染中非常重要的病原菌之一ｆ１］。由于头孢吡 定／药敏测试系统检测和琼脂稀释法证实的ＦＥＰ的 肟的大量使用，临床分离出头孢吡肟敏感性低于头 ＭＩＣ高于ＣＡＺ的ＭＩＣ的８株阴沟肠杆菌，剔除同 孢他啶的铜绿假单胞菌［２ ］，且与ＯＸＡ一１、ＯＸＡ一１Ｏ、 一患者相同部位重复菌株。试验操作及菌株ＭＩＣ ＯＸＡ－３１、ＯＸＡ一３５或ＰＳＥ－１等耐药基因有关【４］。本 判断参照美国临床实验室标准化协会（ＣＬＳＩ）（２０１５ 文对阴沟肠杆菌头孢吡肟敏感性低于头孢他啶的的 版）标准。质控菌株为大肠埃希菌（ＡＴＣＣ ２５９２２） 相关耐药基因进行研究。 及铜绿假单胞菌（ＡＴＣＣ ２７８５３）。利福平耐药的大 肠埃希菌ＥＣ６０Ｏ为接合试验用。 基金项目：四川大学与泸州市人民政府战略合作项目，２０１３ＣＤＬＺ－Ｓ１５ １．２试剂与材料 ＦＥＰ和ＣＡＺ干粉为中美上海 ＊通讯作者 中国实验诊断学２０１６年１２月 第２Ｏ卷第１２期 施贵宝制药有限公司产品，ＭＨ琼脂干粉为杭州天 和产品，Ｉ Ｂ培养基为Ｏｘｏｉｄ公司产品，质粒提取试 剂盒为百泰克公司产品，ＰＣＲ引物、Ｂｕｆｆｅｒ、ｄＮＴＰｓ、 Ｔａｑ ＤＮＡ酶和ＭｇＣＩ ２为ＴａＫａＲａ公司产品，ＤＮＡ Ｍａｒｋｅｒ ＤＩ ２０００为大连宝生公司产品，琼脂糖为 ｏＸＡ一１、ｏＸＡ一１０、ＯＸＡ一３１、ＯＸＡ一３５和ＰＳＥ一１，引物 见表ｌ。反应体系（５０ １）：ＴａＫａＲａ Ｅｘ Ｔａｑ（５ ｕ／ １）０．２５ ｌ，１０×ＥＸ Ｔａｑ Ｂｕｆｆｅｒ（Ｍｇ ｆｒｅｅ）５ ｌ， ＭｇＣ１２（２５ ｍＭ）４ ｌ，ｄＮＴＰ Ｍｉｘｔｕｒｅ（各２．５ ｍＭ）４ ｌ，模板２ ｌ，上游引物（１０ Ｍ）ｌ ｌ，下游引物（１０ １）１ ｌ，加０．１ ＲＮＡ酶的灭菌蒸馏水至５Ｏ ｌ。 Ｏｘｏｉｄ公司产品。引物序列由生工生物工程（上海） 股份有限公司合成。 反应参数 ］，见图１。反应结束后取６ １产物在１５ ｇ／Ｌ琼脂糖中进行电泳分析。 １．３细菌总ＤＮＡ耐药基因扩增 煮沸法提取细菌 总ＤＮＡ作为模板，通过降落ＰＣＲ扩增耐药基因 表１本研究所用的ＰＣＲ引物 环每２循环降低 …………— Ｉ Ｉ ５０＂（２ ３０ Ｉ ！！ ！ 竺ｌ １——８—循＋５环 ａｒｉｎ 退火温度２℃ 图１ 本研究所用ＰＣＲ反应参数 １．４耐药酶基因水平传播分析 １．４．１ 质粒耐药基因 根据质粒提取试剂盒说明 ２ 结果 ２．１ 细菌总ＤＮＡ耐药基因扩增结果 ８株菌株中有３株（２、４、７号菌株）耐药基因 （）ＸＡ一１和（）ＸＡ一３ｌ同时阳性，２株（５号、８号菌株） 耐药基因（）ＸＡ一１０、（）ＸＡ一３５同时阳性，耐药基因 书，对耐药基因阳性菌株提取质粒ＤＮＡ作为反应 模板．对相应的耐药基因进行ＰＣＲ扩增。 １．４．２ 接合试验 对质粒ＤＮＡ耐药基因扩增阳 性菌株进行接合试验。方法同文献报道 Ｊ。 ＰＳＥ一１全部阴性。扩增产物电泳图见图２－５。 ＤＬ２Ｏｏ０ ２ ０００ ｌ一－ 一言 ｌ ０００ ７５０ ５０ｏ Ｉ － － － 苎 图３ ＯＸＡ－３１扩增产物电泳图 ２５０ ｌｏ０ 图２ ＯＸＡ－！扩增产物电泳图 ２０６Ｏ ＤＬ２Ｏ００ ２ ｏ００ １ ０ｏＯ ７５０ ５００ ２５０ ｌ００ 图４ ＯＸＡ－１０基因扩增电泳图 图５ ＯＸＡ－３５基因扩增电泳图 备注： ２ ５ Ｉｌｔ １ ８分别为１—８号Ｉ菊株，Ｎ为阴 对照．Ｍ为Ｉ）ＮＡ Ｍａｒｋｅｒ（Ｉ）Ｉ ２００Ｏ） ２．２质粒ＤＮＡ耐药基因扩增结果 相应基因扩增均为阳性．即２号、４号、７号菌株质粒 ＤＮＡ耐药基因（）ＸＡ一１和（）ＸＡ一３１同时阳性．而５ ３５同时阳性。扩增产物电泳图见图６。 （）ＸＡ一３５和ＰＳＥ １进行扩增．结果显示：有５株扩增 和（）ＸＡ一３１同时阳性，与文献 报道一致，（）ＸＡ一１ 基因的表达能使阴沟肠杆菌头孢吡肟或头孢匹罗的 细菌总ＤＮＡ耐药基因阳性菌株的质粒ＤＮＡ 阳性。其中２号、４号和７号菌株耐药基因（）Ｘ八一１１ 号、８号菌株质粒ＤＮＡ耐药基因（）ＸＡ一１０和（）ＸＡ～ ＭＩＣ升高，而对头孢他啶没有影响，尤其是当孔蛋白 （）ＭＰ钝化或表达降低时．这种效应更明显。其机 制【１ ４ １可能为（）ＸＡ一１能选择性地水解一些具有２一氨 ＤＬ２０００ ２ ００Ｏ １ ｏｏＯ ７５０ 綦一５噻唑基结构的头孢菌素类，如头孢吡肟、头孢匹 罗，而对其他类型的头孢菌素没有水解作用．如头孢 他啶。并且耐药基因（）ＸＡ～ｌ和（）ＸＡ一３１对以 特 ５００ ２５０ １００ 殊耐药表型的影响具有协同作用 。而５号和８号 菌株耐药基因（）ＸＡ一１０和（）Ｘ人一３５同时阳性，原 因 可能为ＯＸＡ一３５是一种ＯＸＡ一１０相关的８内酰 图６细菌质粒ＤＮＡ耐药基因扩增电泳图 备注：１ ３分别为２号、４号、７号菌株ｂｌａ（）ＸＡ－１．４、５分别为５号、８ ２ 胺酶，两者均可以使头孢吡肟敏感性降低，而对头孢 他啶无明显影响。由于具有以上特殊耐药表型的菌 株数量较少，ＰＳＥ一１扩增结果全部为阴性。５株耐药 基因阳性菌株质粒ＤＮＡ相应基因全为阳性．其中有 ２株接合成功，可能与菌株携带耐药基因的整合子有 关Ｉ 。 菌株ｂｌａＯＸＡ一１０．６—８为分别为２号、４呼、７号菌株ｂｌａＯＸＡ ３１，９、１０分别为５号、８号菌株ｂｌａ（）ＸＡ一３５．Ｎ为阴性埘照．Ｍ 为ＤＮＡ Ｍａｋｅｒ（ＤＬ２０００） 湖卿 ２．３接合试验 ２号和５号菌株质粒接合试验成功，经Ｍｉ— ｃｒｏＳｃａｎ ＷａｌｋＡｗａｙ ９６ Ｐｌｕｓ全自动微生物鉴定／药 敏测试系统鉴定为大肠埃希菌，分别扩增出ＯＸＡ一１、 （）Ａ一３１和（）ＸＡ—ｌ０、ＯＸＡ一３５。 头孢吡肟敏感性低于头孢他啶的阴沟肠杆菌耐 药基因可通过质粒介导传播，应引起临床医师和感 染控制人员的高度警惕，应采取措施防止其爆发流 行。 作者简介：余建洪．男．主管检验师、临床执业医师，医学硕 士．研究方向：临床检验诊断学。 参考文献： ［１］胡付品，朱德妹．汪复。等．２０１ ３年中 ＣＨＩＮＥ］、细ｌｊ｛ｉ耐药－ｒｔ－监 ３讨论 肠杆菌科细菌是医院获得性感染的重要细菌之 一，占所有分离菌株的４５．３ ．而肠杆菌属临床分离 率在肠杆菌科细菌中排名第三位，仅次于大肠埃希 菌和克雷伯菌属 。而阴沟肠杆菌是肠杆菌属的典 型代表，随着第４代头孢菌素的使用，头孢吡肟耐药 率逐年增加，敏感性明显下降 ］。阴沟肠杆菌的耐 药机制主要有耐药酶的产生、外排系统的过度表达 测［Ｊ］．巾国感染与化疗杂志．２０ｌ ４．１ ４（５）：３６５． ［２］曾章锐．王 萍，黄 梅，等．Ｉ临床分离的铜绿假单胞菌对头孢吡 敏感性低于头孢他啶的机制研究［Ｊ］．检验医学．２０１ ｔ．２【］（１ １）： ｌ１７８． 以及质粒携带多药耐药整合子基因『＿Ｉ￣１ １ ２］。 本文对８株头孢吡肟敏感性低于头孢他啶阴沟 肠杆菌的耐药基因（）ＸＡ一１、【）ＸＡ—ｌ０、ＯＸＡ一３１、 ［．州Ｃａｎａｐｏ Ｅｓｑｕｉｓａｂｅｌ ＡＢ．Ｒｏｄｒｉｇｕｅｚ ＭＣ．Ｃａｍｐｏ Ｓｏｓａ Ａ（）． Ｉ ａ１． Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ｏｆ ｒｅｓｉｓｌａｎｔｅ ｉｎ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｉｓｏｌａｌｅｓ ｏｆ Ｉ’ ￣ｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ ｌｅｓｓ ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｌｅ Ｉｆ】【．＿（＿－ｆｅｐｉｍｔ－ｔｈａｎ ｔ（）ｃｅｆｔａｚｉｄｉｍｅ¨＿１＿ ｉｍ１．‘）０１ １．１ ７ １‘）１．１ １ ７ 中国实验诊断学２０１６年１２月 第２Ｏ卷第１２期 ｃｒｏｂ Ａｇｅｎｔｓ，２０１０，３５（５）：４７８． ～２Ｏ６１一 ｒ４］Ｐｅｎａ Ｃ，Ｓｕａｒｅｚ Ｃ，Ｔｕｈａｕ Ｆ，ｅｔ ａ１．Ｎｏｓｏｃｏｍｉａｌ Ｏｕｔｂｒｅａｋ ｏｆ ａ Ｎｏｎ— Ｃｅ—．Ｆｅｐｉｍｅ——Ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｌｅ Ｃｅｆｔａｚｉｄｉｍｅ——Ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｌｅ Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ［１３］Ａｌｅｊａｎｄｒｏ Ｂｅｃｅｉｒｏ，Ｓｕｎｉｌ Ｍａｈａｒｊａｎ，Ｔｏｍ Ｇａｕ！ｔｏｎ，ｅｔ ａ１．Ｆａｌｓｅ ｅｘ— ｔｅｎｄｅｄ—ｓｐｅｃｔｒｕｍ Ｄ ｌａｃｔａｍａｓｅ ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ ｉｎ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｉｓｏｌａｔｅｓ ｏｆ Ｅｓｃｈｅｒｉｅｈｉａ ｃｏｌｉ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ０ＸＡ～１ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ ｓｔｒａｉｎ ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓ８ｉｎｇ ＭｅｘＸＹ—ＯｐｒＭ ａｎｄ ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ ａｎ ｉｎｔｅｇｒｏｎ—ｂｏｒｎｅ ＰＳＥ一１ Ｇ ｌａｃｔａｍａｓｅ［Ｊ］．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，２００９，４７ （８）：２３８１． ｏｒ ＴＥＭ一１ ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎａｓｅｓ ａｎｄ ｌｏｓｓ ｏｆ ｐｏｒｉｎｓ［Ｊ］．Ｊ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ｃｈｅ— 杰，季明春，等．一种优化的ＰＣＲ方法～—降落ＰＣＲ ｍｏｔｈｅｒ，２０ｌ１，６６：２００６． ［５］万兵，闫扩增目的基因［Ｊ］．江苏ｌ临床医学杂志，２００２，６（２）：１２７． ［１ ４］Ａｕｂｅｒｔ Ｄ，Ｐｏｉｒｅｌ Ｉ ，Ｃｈｅｖａｌｉｅｒ Ｊ，ｅｔ ａ１．Ｏｘａｃｉｌｌｉｎａｓｅ Ｍｅｄｉａｔｅｄ Ｒｅ ｓｉｓｔａｎｃｅ ｔｏ Ｃｄｅｐｉｍｅ ａｎｄ Ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ ｔｏ Ｃｅｆｔａｚｉｄｉｍｅ ｉｎ Ｐｓｅｕｄｏ Ｅ６］田鹏鹏，朱丽莎，艾彪，等．１株阴沟肠杆菌临床分离株对亚胺培 南耐药机制的研究［Ｊ］．重庆医学，２０１６，４５（７）：９７０． ［７］胡付品，朱德妹，汪复，等．２Ｏ１４年ＣＨＩＮＥＴ中国细菌耐药性监 ｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ［Ｊ］．Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ａｇｅｎｔｓ ａｎｄ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ， ２００１，４５（６）：１６１５． 测ＥＪ］．中国感染与化疗杂志，２０１５，１５（５）：４０１． ［８］周祥，惠红岩，金保哲，等．ＮＳＩＣＵ患者阴沟肠杆菌感染分布与 ［１５］Ａｕｈｅｒｔ Ｄ，Ｐａｉｒｅｌ Ｌ，Ｃｈｅｖａｌｉｅｒ，ｅｔ ａ１．Ｏｘａｃｉｌｌｉｎａｓｅ—ｍｅｄｉａｔｅｄ ｒｅｓｉｓｉ ｔａｎｃｅ ｔｏ ｃｅｆｅｐｉｍｅ ａｎｄ ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ ｔｏ ｃｅｆｔａｚｉｄｉｍｅ ｉｎ Ｐｓｅｕｄｏ 耐药性分析口］．中华医院感染学杂志，２０１５，２５（１０）：４５８３． ［９］刘鹏飞，陈佑明，孙恒彪，等．阴沟肠秆菌耐药性分析及ＮＤＭ １基 因检测［Ｊ］．中华医院感染学杂志，２０１４，２４（２１）：５２０４． ｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ［Ｊ］．Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ，２００１，４５： １６１５—１６２０． ［１６］Ｄａｎｉｅｌ Ａｕｂｅｒｔ，Ｌａｕｒｅｎｔ Ｐｏｉｒｅｌ，Ａｄｄ Ｂｅｎ Ａｌｌ，ｅｔ ａ１．ＯＸＡ一３５ ｉｓ ａｎ ＯＸＡ一１０ ｒｅｌａｔｅｄ￣－ｌａｃｔａｍａｓｅ ｆｒｏｍ Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ［Ｊ］． ２Ｏ０１，４８：７１７． ［１ｏ］王凤霞．阴沟肠杆菌的耐药性分析及其耐药机制研究［Ｊ］．中华 医院感染学杂志，２０１３，２３（２１）：５１２８． ＿ｌ１］温见翔，陈娟，杨虹．阴沟肠杆菌ＡｃｒＡＢ－ＴｏＩＣ外排系统基因 ［１７］李岩，苏建荣，许淑珍，等．阴沟肠杆菌的Ｉ类整合子检测及相 研究［Ｊ］．中国实验诊断学，２０１４，１８（７）：１０５８． ［１２］Ｈｏｒｎｓｅｙ Ｍ，Ｅｌｌｉｎｇｔｏｎ ＭＪ，Ｄｏｕｍｉｔｈ Ｍ，ｅｔ ａ１．Ｅｍｅｒｇｅｎｃｅ ｏｆ Ａｃ— ｒＡＢ－ｍｅｄｉａｔｅｄ ｔｉｇｅｃｙｃｌｉｎｅ ｒｅｓｉｓｉｔａｎｃｅ ｉｎ ａ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｉｓｏｌａｔｅ ｏｆ Ｅｎｔｅｒ— 关耐药基因分析［Ｊ］．中国实验诊断学，２Ｏ１ｏ，１４（９）：１３５６． （收稿日期：２０１６一Ｏ４—２８） ｏｂａｅｔｅｒ ｃｌｏａｃａｅ ｄｕｒｉｎｇ ｃｉｐｒｏｆｌｏｘａｃｉｎ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ＿Ｊ］．Ｉｎｔ Ｊ Ａｎｔｉｍｉ一 文章编号：１００７—４２８７（２０１６）１２—２０６１—０５ 凝血四项指标和肿瘤标志物在乙型肝炎病毒感染 相关肝硬化和原发性肝癌中的诊断价值 李正康，张鑫强，刘素玲，侯铁英 （广东省人民医院检验科，广东省医学科学院，广东广州５１００８０） 摘要：目的对慢性乙肝感染（ＣＨＢ）不同疾病进程患者的临床特征进行比较分析，并对凝血四项指标（ＡＰＴＴ、 ＦＩＢ、ＰＴ和ＴＴ）和肿瘤标志物（ＡＦＰ、ＣＡ１２５、ＣＡ１９—９和ＣＥＡ）在乙肝病毒感染相关肝硬化和原发性肝癌中的诊断价 值进行评价。方法选择２０１３年１月至２Ｏ１５年１月在广东省人民医院住院的ＣＨＢ患者进行回顾性研究，患者分为 肝硬化组（ＬＣ）、原发性肝癌组（ＰＨＣ）和ＣＨＢ对照组。收集患者的人口学资料、乙肝病毒感染相关指标、肝功能指标、 凝血四项和肿瘤标志物的检测结果进行组间比较分析，并采用受试者工作特征曲线（ＲＯＣ）和ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归进行诊断分 析。结果２６８例ＣＨＢ患者纳入分析，其中ＬＣ患者８４例，ＰＨＣ患者９２例，对照组ＣＨＢ患者９２例。各组临床特征 比较分析发现，ＰＨＣ患者的平均年龄最高（５３．２２±１４．３５岁，Ｐ＜０．００１）。ＣＨＢ组的ＨＢｅＡｇ阳性率、ＨＢＶ ＤＮＡ水 平、白蛋白和ＡＬＴ水平显著高于ＬＣ组和ＰＨＣ组（Ｐ均小于０．００１）。ＬＣ组的ＡＰＴＴ、ＰＴ、ＣＥＡ指标在各组中最高 （Ｐ均小于０．０５），而肌酐、ＦＩＢ、ＡＦＰ和ＣＡ１２５指标在ＰＨＣ组中则显著高于其它两组（Ｐ均小于０．０５）。在诊断性分 析中，ＣＡ１２５与ＰＴ对ＬＣ的诊断具有统计学意义，其曲线下面积（ＡＵＣ）分别为０．７７和０．７２。ＡＦＰ、ＦＩＢ和ＣＡ１２５对 ＰＨＣ具有诊断意义，其ＡＵＣ分别为０．７３、０．６９和０．８３，三者联合诊断ＰＨＣ的ＡＵＣ为０．９０２（Ｐ＜０．００１），灵敏度和 特异度分别为９０．３ 和７８．０％。结论ＡＦＰ联合ＦＩＢ和ＣＡ１２５可显著提高ＰＨＣ的诊断效能。 关键词：病毒性肝炎，乙型；临床特征；凝血四项；肿瘤标志物 基金项目：广东省协同创新与平台环境建设专项基金（项目编号：２０１５Ａ０５０５０２０３３） ＊通讯作者