・１００８・生堡塞坠窆Ｅ型盘查！Ｑ！！生！旦箜！！鲞箜兰翅垦ｉｉ！』堡翌！！望：垒Ｐ堕！！Ｑ！！：！！！：！！，塑！：垒・实验研究・右美托咪定预处理对小鼠肺缺血一再灌注损伤时微小ＲＮＡ．２１０表达的影响徐刚卢锡华作者单位：４５０００８郑州大学附属肿瘤医院麻醉科通信作者：卢锡华，Ｅｍａｉｌ：ｌｘｈ—ｈｎｓｚｌｙｙ＠１２６．ｃｏｍＤＯＩ：１０．３７６０／ｃｍａ．ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－９０３０．２０１６．０４．０４３【摘要】目的观察右美托咪定（Ｄｅｘ）预处理对小鼠肺缺血／再灌注损伤（ＰＩＲＩ）时微小ＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ，ｍｉＲ）－２１０表达的影响。方法采用Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ小鼠在体单侧原位ＰＩＲＩ模型。按照随机数字表法将小鼠４５只随机分为３组，每组１５只：假手术组（Ｓｈａｍ组）、缺血－再灌注组（Ｉ／Ｒ组）和Ｄｅｘ预处理组（Ｄｅｘ组）。Ｄｅｘ组于缺血前３０ｍｉｎ经腹腔注射Ｄｅｘ２５斗ｇ／ｋｇ，Ｓｈａｍ组和Ｉ／Ｒ组分别经腹腔注射等量生理盐水。各组实验结束后处死小鼠，留取左肺，分别检测肺组织湿／干重比（Ｗ／Ｄ）和总肺水含量（ＴＬｗ），光镜观察肺组织形态学并测定肺泡损伤率（ＩＡＲ），电镜观察肺组织超微结构改变，实时荧光定量聚合酶链反应（ＦＱ．ＰＣＲ）法检测肺组织ｍｉＲ－２１０表达，原位缺Ｅｌ末端标记法（ＴＵＮＥＬ）检测肺组织细胞凋亡指数（ＡＩ）。结果与Ｓｈａｍ组［４．３４±０．２５、３．３３±０．２４、（５．７３±１．９６）％、（４．８６土０．９７）％］比较，Ｉ／Ｒ小鼠组肺组织Ｗ／Ｄ（５．９５±０．４３）、ｒＩ＇ＬＷ（４．６８±０．４２）、ＩＡＲ［（４０．４７±５．９３）％］和ＡＩ［（３５．３６４－５．９３）％］均升高（Ｐ＜０．０５），肺组织ｍｉＲ一２１０表达（４．７３±０．７８比１．０７±０．３８）上调（Ｐ＜０．０５），肺组织形态学结构及超微结构均发生损伤。与Ｉ／Ｒ组比较，Ｄｅｘ组肺组织Ｗ／Ｄ（５．３６±０．１４）、ＴＬｗ（４．２５±０．１８）、ＩＡＲ［（１４．７２４－３．５７）％］和ＡＩ［（１６．４９４－２．５１）％］均降低（Ｐ＜０．０５），肺组织ｍｉＲ．２１０表达（１．５３±０．４５比４．７３±０．７８）下调（Ｐ＜０．０５），肺组织形态学结构及超微结构损伤均减轻。结论Ｄｅｘ预处理可能通过下调肺组织ｍｉＲ一２１０的表达，减少肺组织细胞凋亡，从而减轻小鼠Ｉ／Ｒ所致的急性肺损伤。【关键词】右美托咪定；微小ＲＮＡ一２１０；肺缺血；再灌注损伤ＥｆｆｅｃｔｏｆｄｅｘｍｅｄｅｔｏｍｉｄｉｎｅｐｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｉｎｇｏｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｍｉｃｒｏＲＮＡ－－２１０ｄｕｒｉｎｇｐｕｌｍｏｎａｒｙｉｓ－ＸｕＧａｎｇ，ｈＸｉｈｕａｃｈｅｍｉａ—ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎｉｎｊｕｒｙｉｎｍｉｃｅＤｅｐａｒｔｍｅｎｔＣｈｉｎａｏｆＡｎｅｓｔｈｅｓｉｏｌｏｇｙ，ｔｈｅＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＴｕｍｏｒＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＺｈｅｎｇｚｈｏｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ４５０００８，Ｘｉｈｕａ，Ｅｍａｉｆ：Ｉｘｈ』ｍｚｌｙｙ＠１２６．ｃｏｒｎ【Ａｂｓｔｒａｃｔ】０ｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｄｅｘｍｅｄｅｔｏｍｉｄｉｎｅ（Ｄｅｘ）ｐｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｉｎｇｏｎｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｍｉｅｒｏＲＮＡ一２１０（ｍｉＲ一２１０）ｄｕｒｉｎｇｐｕｌｍｏｎａｒｙｉｓｅｈｅｍｉａ—ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎｉｎｊｕｒｙ（ＰＩＲＩ）ｉｎｍｉｃｅ．ＭｅｔｈｏｄｓＭｏｕｓｅｍｏｄｅｌｏｆＰＩＲＩｉｎｓｉｔｕｗａｓｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄｗｉｔｈｕｎｉｌａｔｅｒａｌｌｕｎｇｉｎｖｉｖｏ．Ｆｏｒｔｙ—ｆｉｖｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｍｉｃｅｗｅｒｅｒａｎｄｏｍｌｙａｌｌｏｃａｔｅｄｉｎｔｏｔｈｒｅｅｇｒｏｕｐｓ：ｓｈａｍｏｐｅｒａｔｉｏｎｇｒｏｕｐ（ｓｈａｍｇｒｏｕｐ），ｉｓｃｈｅｍｉａ—ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎｇｒｏｕｐ（Ｉ／Ｒ）ａｎｄＤｅｘｐｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｉｎｇｇｒｏｕｐ（Ｄｅｘｇｒｏｕｐ），１５ｍｉｃｅｐｅｒｇｒｏｕｐ．Ｄｅｘｗａｓｉｎｊｅｃｔｅｄｉｎｔｒａｐｅｒ－Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｔｔｔｈ０７：Ｌｕｉｔｏｎｅａｌｌｗｉｔｈ２５“ｇ／ｋｇａｔ３０ｍｉｎｂｅｆｏｒｅｉｓｃｈｅｍｉａｉｎＤｅｘｇｒｏｕｐ．Ｔｈｅｅｑｕａｌｖｏｌｕｍｅｏｆｎｏｒｍａｌｓａｌｉｎｅｗａｓｉｎ—ｊｅｃｔｅｄｉｎｔｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌｌｉｎｇｒｏｕｐａｎｄＩ／Ｒｇｒｏｕｐ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｍｉｃｅｗｅｒｅｅｕｔｈａｎｉｚｅｄａｆｔｅｒｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｓｈａｍｔｉｍｅｏｕｔ．ａｎｄｌｅｆｔｌｕｎｇｔｉｓｓｕｅｗａｓｅｘｔｒａｃｔｅｄ．Ｗｅｔｌｕｎｇｗｅｉｇｈｔａｎｄｄｒｙｌｕｎｇｗｅｉｇｈｔ（Ｗ／Ｄ）ａｎｄｔｏｔａｌｌｕｎｇｗａｔｅｒｃｏｎｔｅｎｔ（ＴＬＷ）ｗｅｒｅｔｅｓｔｅｄ．Ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙｏｆｌｕｎｇｔｉｓｓｕｅｗａｓｏｂｓｅｒｖｅｄａｎｄｉｎｊｕｒｅｄａｌｖｅｏｌａｌ＂ｒａｔｅ（ＩＡＲ）ｗａｓｔｅｓｔｅｄｂｙｌｉｇｈｔｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ．ａｎｄｕｌｔｒａｓｔｒｕｃｔｕｒｅｏｆｌｕｎｇｔｉｓｓｕｅｗａｓｏｂｓｅｒｖｅｄｂｙｅｌｅｃｔｒｏｎｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ．ＴｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｍｉＲ一２１０ｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙｒｅａｌ—ｔｉｍｅｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎｔｅｒｍｉｎａｌ—ｄｅｏｘｙｎｕｃｌｅｏｉｔｉｄｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅｍｅｄｉａｔｅｄｎｉｃｋｅｎｄｌａｂｅｌｉｎｇ（ＴＵＮＥＬ）ｍｃＬｈｏｄ．ＲｅｓｕｌｔｓＣｏｍｐａｒｅｄｔｏｓｈａｍｇｒｏｕｐ［４．３４±０．２５，３．３３±０．２４，（５．７３±１．９６）％，（４．８６土０．９７）％］，ｗ／Ｄ（５．９５－ｔ－０．４３），ＴＬｗ（４．６８±０．４２），ＩＡＲ［（４０．４７士５．９３）％］ａｎｄＡＩ［（３５．３６±５．９３）％］ｏｆｔｌｌｅｌｕｎｇｔｉｓｓｕｅｗｅｒｅａｌｌｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｃｒｅａｓｅｄ（Ｐ＜０．０５），ｔＩｌｅｅｘｐ．ｒｅｓｓｉｏｎｏｆｍｉＲ一２１０（４．７３±０．７８ｖｓ．１．０７±０．３８）ｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｕｐ—ｒｅｇｕｌａｔｅｄ（Ｐ＜０．０５），ｉｎ－（ＦＱ—ＰＣＲ）．Ａｐｏｐｔｏｓｉｓｏｆｌｕｎｇｔｉｓｓｕｅｗａｓｂｙ；ｕｒｙｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｏｆｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙａｎｄｕｈｒａｓｔｒｕｃｔｕｒｅｏｆｔｈｅｌｕｎｇｔｉｓｓｕｅｗａｓａｌｌｅｖｉａｔｅｄｉｎＬ／Ｒｇｒｏｕｐ．ＣｏｍｐａｒｅｄｔｏＩ／Ｒｇｒｏｕｐ，Ｗ／Ｄ（５．３６±０．１４），ＴＬｗ（４．２５±０．１８），ＩＡＲ［（１４．７２±３．５７）％］ａｎｄＡＩ［（１６．４９±２．５１）％］ｏｆｔｈｅｌｕｎｇｔｉｓｓｕｅｓｗｅｒｅａｌｌｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｒｅｄｕｃｅｄ（Ｐ＜０．０５），ｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｍｉＲ一２１０（１．５３±０．４５ｖｓ．４．７３±０．７８）ｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｄｏｗｎ—ｒｅｇｕｌａｔｅｄ（Ｐ＜０．０５），ｔｈｅｉｎｊｕｒｙｏｆｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙａｎｄｕｈｒａｓｔｒｕｃｔｕｒｅｏｆｌｕｎｇｔｉｓｓｕｅｗａｓａｌｌｅｖｉａｔｅｄｉｎＤｅｘｇｒｏｕｐ．ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＤｅｘｐｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｉｎｇｍａｙｂｅａｌｌｅ－万方数据虫堡塞坠处型苤盍！鱼！！生兰月筮塑鲞筮垒翅垦堕！』垦兰卫；坠强：垒ｅ巫！垫！！，！！！：！！，型！：堡ｖｉａｔｅｌｕｎｇｉｎｊｕｒｙｉｎｄｕｃｅｂｙＩ／Ｒｉｎｍｉｃｅｂｙｄｏｗｎ—－ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｍｉＲ・—２１０ｏｆｌｕｎｇｔｉｓｓｕｅａｎｄｄｅｃｒｅａｓｉｎｇｐｎｅｕｍｏｎｏｃｙｔｅａｐｏｐｔｏｓｉｓ．【Ｋｅｙｗｏｒｄｓ】Ｄｅｘｍｅｄｅｔｏｍｉｄｉｎｅ；ＭｉｃｒｏＲＮＡ一２１０；Ｌｕｎｇｉｓｃｈｅｍｉａ；Ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎｉｎｊｕｒｙ近来研究结果表明，肺缺血一再灌注损伤（ＰＩ砌）的发生与肺组织细胞凋亡密切相关¨ｏ，且干预细胞凋亡对其有一定的防治作用拉Ｊ。但其具体作用机制、通过哪条通路引起肺组织损伤至今尚未完全阐明。微小ＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ，ｍｉＲ）－２１０是一种具有缺氧诱导活性的ｍｉＲＮＡ，在缺氧、缺血等条件下其表达可上调旧ｏ，参与机体的细胞凋亡【４Ｊ。右美托咪定（Ｄｅｘ）是一种临床麻醉中常用的麻醉辅助用药，具有镇静和镇痛等作用。目前已有学者观察了Ｄｅｘ应用于实验性心、脑及肝等缺血．再灌注（Ｉ／Ｒ）所致损伤的效果，初步发现Ｄｅｘ对Ｉ／Ｒ所致损伤发生的脏器具有良好保护作用，其治疗机制与抗氧化应激、抑制炎症性细胞因子释放等有关”引。我们建立小鼠原位ＰＩＲＩ模型，以Ｄｅｘ对模型进行干预，观察肺组织中ｍｉＲ－２１０表达的变化来探讨Ｄｅｘ的可能作用机制。材料与方法１．材料：无特定病原体（ＳＰＦ）级Ｃ５７ＢＬ／６成年小鼠４５只，雄性，６～８周，体重（２０±２）ｇ。由本院实验动物中心提供，研究方案经本院医学研究伦理委员会审核并实施。ＲＷＤ４０７小动物呼吸机（深圳市瑞沃德生命科技有限公司）；实时荧光定量聚合酶链反应（ＦＱ．ＰＣＲ）仪（日本Ｂｉｏｅｒ公司）；电热恒温鼓风干燥箱（上海圣科仪器设备有限公司）；ＡＬ２０４电子称（美国梅特勒一托利多公司）；ＢＸ５３光学显微镜（日本奥林巴斯公司）；Ｈ－７５００型透射电镜（日本Ｈｉｔａｃｈｉ公司）；盐酸右美托咪定注射液（生产批号：１５０５１３３２，江苏恒瑞医药股份有限公司）；原位细胞凋亡检测试剂盒（德国Ｒｏｃｈｅ公司）；ｍｉＲＮｅａｓｙｍｉｎｉ试剂盒（德国Ｑｉａｇｅｎ公司）；ＰｒｉｍｅＳｃｒｉｐｔ删反转录试剂盒、ＳＹＢＲＰｒｅｍｉｘＥｘＴａｑ（ＴｌｉＲＮａｓｅＨＰｌｕｓ，大连宝生物工程有限公司）；二氨基联苯胺（ＤＡＢ）显色试剂盒（北京中杉金桥生物科技有限公司）；脱氧核糖核酸酶Ｉ（美国Ｓｉｇｍａ公司）；其余均为市售分析纯。２．动物模型制备：按照随机数字表法将４５只小鼠分为３组，每组１５只：假手术组（Ｓｈａｍ组）、Ｉ／Ｒ组和Ｄｅｘ预处理组（Ｄｅｘ组）。按照文献［７］报道的方法制备小鼠原位ＰＩＲＩ模型。小鼠经腹腔注射氯胺酮０．１ｍｓ／ｇ＋塞拉嗪０．０１ｍｇ／ｇ进行麻醉，以后每小时追加首剂１／３。消毒颈部皮肤，逐层分离皮肤、筋膜和肌肉，暴露气管，切开气管并插管，连接小动物呼吸机，行机械通气，呼吸机参数设置：潮气量０．６ｍｌ，呼吸频万方数据率１２０影分，吸呼比＝３：２。电热毯保温，监测体温。消毒左胸部皮肤，分离筋膜和肌肉，断开第二、三肋骨，打开胸腔，充分暴露左肺，找到左肺门并以微型动脉夹夹闭３０ｍｉｎ，即为缺血期；之后松开动脉夹，形成再灌注期。再灌注３ｈ后结束实验，注射过量麻醉药使小鼠安乐死，留取左肺组织。Ｓｈａｍ组只开胸不夹闭肺门，余下步骤同Ｉ／Ｒ组，观察３．５ｈ后处死并取左肺。Ｄｅｘ组于缺血前３０ｒａｉｎ经腹腔注射Ｄｅｘ２５斗ｇ／ｋｇ，Ｓｈａｍ组和Ｉ／Ｒ组分别经腹腔注射等量生理盐水。３．小鼠肺组织湿／干重比（Ｗ／Ｄ）和总肺含水量（ＴＬＷ）：各组处死小鼠并取左肺上叶组织，用生理盐水充分漂洗，滤纸吸干多余水分，称重为湿重（ｗ）；７０℃下２４ｈ烘干后称重为干重（Ｄ），两者之比为Ｗ／Ｄ；ＴＬＷ＝（Ｗ—Ｄ）／Ｄ。４．光镜检测小鼠肺组织形态学变化及测定肺泡损伤率（ＩＡＲ）：各组处死小鼠取左肺下叶０．５ｃｍ×０．５ｃｍ×０．５ｅｍ大小肺组织，经４％甲醛固定，常规石蜡包埋切片，苏木素一伊红（ＨＥ）染色，显微镜下观察各组标本组织学改变。按文献报道的方法测定ＩＡＲ¨１。５．小鼠肺组织电镜检测：各组处死小鼠后取左肺近肺门处１ｍｍ×１ｍｍ×１ｍｍ大小的肺组织，经２．５％戊二醛前固定，再依次经１％锇酸后固定，１％醋酸铀块染，乙醇梯度脱水，丙酮浸透，Ｅｐｏｎ８１２包埋聚合，半薄切片和超薄切片，经醋酸铀和硝酸铅双重染色后，于电镜下观察各标本组织学结果。６．ＦＱ．ＰＣＲ法检测小鼠肺组织ｍｉＲ．２１０的表达变化：采用ｍｉＲＮｅａｓｙｍｉｎｉ试剂盒提取Ｉ／Ｒ组和Ｄｅｘ组的肺组织ｍｉＲＮＡ。按照说明书将ｍｉＲ一２１０反转录后行ＦＱ—ＰＣＲ。ｍｉＲ－２１０检测系统为ＳｔｅｐＯｎｅ。ＭＳｏｆｔｗａｒｅｖ２．０，内参为ｕ６。反应条件：９４℃３０ｓ；９４ｏＣ５Ｓ；６０℃３０ｓ；循环数为４０次。Ｓｈａｍ组肺组织作为对照，ＡＡＣｔ＝［ｃ‘实验组一ｃ‘实验组Ｕ６］一［ｃ‘对照组一ｃ‘对照组ｕ６］。以２。△们‘值表示ｍｉＲ－２１０的相对表达量。７．小鼠肺组织细胞凋亡原位检测：采用原位缺口末端标记法（ＴＵＮＥＬ），按照试剂盒说明操作。细胞核中有棕褐色颗粒者为阳性细胞。计数５个高倍镜视野（×４００）下的凋亡细胞数。凋亡指数（ＡＩ，％）＝检测到的凋亡细胞数÷５个高倍视野检测到的细胞总数×１００％。８．统计学方法：使用ＳＰＳＳ１５．０统计软件分析。所有数据进行正态性检验，用均数±标准差（ｘ±ｓ）表示。组间比较采用单因素方差分析。方差齐性者两两・１０１０・生堡塞墅窆Ｅ型盘查！Ｑ！！生！旦筮！！鲞笠！塑鱼垡！』垦堑！！强：垒Ｐ巫！！！！！：！！！：！！：盟！：兰比较采用ＬＳＤ．ｔ法，方差不齐者进行Ｋｒｕｓｋａｌ．Ｗａｌｌｉｓ检验，以Ｐ＜ｏ・０５为差异有统计学意义。结果１．各组小鼠肺组织Ｗ／Ｄ、ＴＬｗ、ＩＡＲ和ＡＩ的比较：与Ｓｈａｍ组比较，Ｉ／Ｒ组肺组织Ｗ／Ｄ、ＴＬＷ、ＩＡＲ和ＡＩ均升高（Ｐ＜０．０５）。与Ｉ／Ｒ组比较，Ｄｅｘ组肺组织Ｗ／Ｄ、ＴＬｗ、ＩＡＲ和ＡＩ均降低（Ｐ＜０．０５，表１）。表ｌ各组肺组织Ｗ／Ｄ、ＴＬｗ、ＩＡＲ、ＡＩ和ｍｉＲ一２１０表达的变化（ｎ＝１５，面±５）注：Ｓｈａｍ：假手术组；Ｉ／Ｒ：缺血－再灌注组；Ｄｅｘ：右美托咪定预处理组；Ｗ／Ｄ：湿／干重比；ＴＬｗ：总肺水含量；ＩＡＲ：肺泡损伤率；ＡＩ：凋亡指数；ｍｉＲ：微小ＲＮＡ；与Ｓｈａｍ组比较，８Ｐ＜０．０５；与Ｉ／Ｒ组比较，６Ｐ＜０．０５２．各组小鼠肺组织ｍｉＲ一２１０表达的比较：与Ｓｈａｍ组比较，Ｉ／Ｒ组肺组织ｍｉＲ一２１０表达上调（Ｐ＜０．０５）。与Ｉ／Ｒ组比较，Ｄｅｘ组肺组织ｍｉＲ－２１０表达下调（Ｐ＜０．０５，表１）。３．各组小鼠肺组织形态学的比较：光镜下，Ｓｈａｍ组小鼠肺组织形态学结构未见明显损伤性改变。Ｉ／Ｒ组小鼠肺组织在形态学上主要表现为：肺泡结构紊乱，肺泡壁水肿增厚或破裂，肺泡内水肿渗出或红细胞漏出或炎性细胞漏出。而Ｄｅｘ组小鼠肺组织损伤程度减轻。４．各组小鼠肺组织超微结构的比较：电镜下，Ｓｈａｍ组小鼠肺组织超微结构未见明显损伤性改变。Ｉ／Ｒ组肺组织超微结构的损伤减轻较明显，内皮细胞肿胀，核染色质分布不均；肺泡Ⅱ型上皮细胞微绒毛减少，胞质中板层小体减少，线粒体肿胀。Ｄｅｘ组肺组织超微结构损伤逐渐减轻，内皮细胞的超微结构清晰可辨，内皮细胞肿胀较轻，核染色质较均匀；肺泡Ⅱ型上皮细胞与邻近结构的界限相当明显，其表面微绒毛较多，线粒体轻度肿胀，嵴较多，嗜锇性板层不多，肺泡隔结缔组织略增厚。５．ＴＵＮＥＬ检测结果比较：ＴＵＮＥＬ法染色示，Ｉ／Ｒ组肺组织中，凋亡细胞核呈褐色，未凋亡细胞核呈蓝色，且凋亡细胞以肺血管内皮细胞及肺泡上皮细胞为主。Ｓｈａｍ组肺组织中几乎未见凋亡细胞。Ｄｅｘ组肺万方数据组织中凋亡细胞明显减少。讨论肺栓塞溶栓治疗、体外循环术、肺动脉血栓内膜剥除术和肺移植术等多种临床情况下均会发生不同程度的ＰＩＲＩ，是术后早期导致呼吸功能障碍乃至患者死亡的关键原因之一，但目前尚未找到有效的防治措施。肺缺血－再灌注的本质为肺脏的缺氧／复氧，在肺脏缺血期，供应肺脏的血流中断，从而引起肺组织缺血／缺氧。ｍｉＲＮＡｓ是一类具有基因调控功能的非编码小分子ＲＮＡ，不具有开放阅读框架，与靶基因ｍＲＮＡ碱基配对并抑制后者的转录及翻译，或剪切后者并促使其降解。ｍｉＲＮＡ对细胞内很多基因进行负调节，参与机体的炎性反应、免疫调节、肿瘤发生和细胞凋亡。ｍｉＲ．２１是一种具有缺氧诱导活性的ｍｉＲＮＡ，在缺氧条件下可通过蛋白激酶Ｂ（Ａｋｔ）一ｐ５３通路使ｍｉＲ．２１０表达上调’８Ｊ。本研究结果中，与Ｓｈａｍ组比较，Ｉ／Ｒ组肺组织ｍｉＲ－２１０表达上调，再次证实，缺血／缺氧可诱导肺组织ｍｉＲ一２１０表达上调。同时，Ｉ／Ｒ组肺组织Ｗ／Ｄ、ＴＬｗ、ＩＡＲ和ＡＩ均升高，肺组织形态学和超微结构均发生损伤，这提示肺组织细胞凋亡和肺组织损伤与肺组织ｍｉＲ－２１０表达上调可能具有一定的相关性。Ｄｅｘ是一种高选择性的仪２肾上腺素受体激动剂，目前已发现Ｄｅｘ对Ｉ／Ｒ所致损伤发生的脏器具有良好保护作用，治疗机制与抗氧化应激、抑制炎症性细胞因子释放以及抗细胞凋亡等有关。９。…。本实验着眼于Ｄｅｘ对ＰＩＲＩ中ｍｉＲ一２１０表达的作用来进行研究。根据有关学者的报道结果选取Ｄｅｘ研究用浓度¨１｜，即于缺血前３０ｍｉｎ给予Ｄｅｘ２５斗ｇ／ｋｇ干预。Ｄｅｘ预处理所选用的剂量目前仍有较多不同说法，我们亦是针对Ｄｅｘ的单一剂量来进行探讨。且由于临床上，Ｄｅｘ多以预先给药的方式实施于患者，因此，我们为了更接近于临床实践而选取Ｄｅｘ预处理的给药方式。本研究结果显示，给予Ｄｅｘ预处理后，Ｄｅｘ组肺组织Ｗ／Ｄ、ＴＬＷ、ＩＡＲ和ＡＩ均下降，光镜和电镜结果提示肺组织损伤形态亦减轻，ＴＵＮＥＬ示肺组织凋亡细胞明显减少；而ｍｉＲ．２１０表达则降低。这提示，Ｄｅｘ在肺缺血一再灌注时可对抗肺组织细胞凋亡，从而减轻ＰＩＲＩ，其机制可能与其抑制氧化应激、炎性反应或Ｉ／Ｒ诱发的ｍｉＲ－２１０表达下调有关。但Ｉ／Ｒ所致损伤是多种因素综合作用的结果，单纯对某一环节进行干预并不能获得最佳效果，因此，Ｄｅｘ对抗ＰＩＲＩ的具体机制尚有待于进一步研究。参考文献［１］ＤｅｎｇＣ，ＺｈａｉＺ，ＷｕＤ，ｅｔａ１．Ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｒｅｓｐｏｎｓｅａｎｄｐｎｅｕｍｏｃｙｔｅ虫堡塞坠处型盘盍！！！！生！旦笠！！鲞塑垒麴垦！也』坠Ｐ！！坚：垒四！！！！！：！！！：！！：盟！：堡ａｐｏｐｔｏｓｉｓｄｕｒｉｎｇｌｕｎｇｉｓｃｈｅｍｉａ。ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎｐｕｌｍｏｎａｒｙｔｈｒｏｍｂｏｅｍｂｏｌｉｓｍ・１０１１・ｉｎｊｕｒｙｉｎＴｈｒｏｍｂａｎｅｘｐｅｒｉｎｍｎｔａｌＴｈｍｍｂｏｌｙｓｉｓ，ＤＯＩ：１０．３１０９／０８８６０２２Ｘ．２０１５．１０１１５５０．ｍｏｄｅｌ［Ｊ］Ｊ［７］２０１５，４０（１）：４２－５３．Ｄ０１：１０．１００７／ｓ１１２３９－０１５．１１８２＿ｘ周俊辉，王良荣，郝卯林，等靶向小干扰ＲＮＡｘ｝／Ｊ＇鼠肺缺血／再灌注损伤时细胞凋亡及ＣＣＡＡＴ／增强子结合蛋白同源蛋白的作用［Ｊ］．中华实验外科杂志，２０１３，３０（８）：１６０８・１６１１．ＺｈｏｕＲＮＡ｛２］ＺｈａｎｇＣ，ＧｕｏＺ．ＬｉｕＨ．ｅｔａ１．Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅｏｆｌｅｖｏｓｉｍｅｎｄａｎｔｉｏｎｉｎｇｓｉｏｎｏｎｐｏｓｔｃｏｎｄｉ．ＪＨ，ＷａｎｇＬＲ，ＨａｏＭＬ，ｅｔａ１．ＥｆｆｅｃｔｓｏｆｔａｒｇｅｔｅｄｓｍａｌｌｉｎｔｅｒｆｅｒｉｎｇＯｌｌａｐｏｐｔｏｓｉｓｏｆｒａｔｌｕｎｇｃｅｌｌｓｉｎａｍｏｄｅｌｏｆｉｓｃｈｅｍｉａ－ｒｅｐｅｒｆｕ—ｐｎｅｕｍｏｅｙｔｅａｐｏｐｔｏｓｉｓａｎｄＣＣＡＡＴ／ｅｎｈａｎｃｅｒ—ｂｉｎｄｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎｐｒｏｔｅｉｎｉｎｐｕｌｍｏｎａｒｙｉｓｃｈｅｍｉａ／ｒｅｐｅｆｆｕｓｉｏｎＥｘｐｉｎｊｕｒｙ［Ｊ］．ＰＬｏＳＯｎｅ，２０１５，１０（１）：ｅ０１１４９６３．ｈｏｍｏｌｏｇｏｕｓＤＯＩ：１０．１３７１／ｉｏｕｍａｌ．ｐｏｎｅ．叭１４９６３．【ＪＩ．ＣｈｉｎＪ『３］ＺａｃｃａｇｎｉｎｉＧ．ＭａｉｍｏｎｅＢ．ＤｉＳｔｅｆａｎｏＶ．ｅｔａ１．Ｈｙｐｏｘｉａ—ｉｎｄｕｃｅｄｔｏａｃｕｔｅｉｎｊｕｒｙｉｎｍｉｃｅＳｕｒｇ，２０１３，３０（８）：１６０８－１６１１．ｍｉＲ－２１０ｍｏｄｕｌａｔｅｓｔｉｓｓｕｅＡｎｔｉｏｘｉｄＲｅｄｏｘｒｅｓｐｏｎｓｅｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ８８．ｉｓｃｈｅｍｉａ『Ｊ］．８Ｄ０１：１０．３７６０／ｃｍａ．ｊ．ｉｓｓｎ．１００１００３０．２０１３．０８．０１８．ＭｕｔｈａｒａｓａｎＲＫ，ＮａｇｐａｌＶ，ＩｃｈｉｋａｗａＹ，ｅｔａ１．ｍｉｃｒｏＲＮＡ－２１０ｉｓｕｐ—ｒｅｇｕｌａｔｅｄｉｎｈｙｐｏｘｉｃｅａｒｄｉｏｍｙｏｃｙｔｅｓｔｈｒｏｕｇｈＡｋｔ—ａｎｄｅｘｅｒｔｓＳｉｇｎａｌ，２０１４，２１（８）：１１７７－ｌｌｐ５３一ｄｅｐｅｎｄｅｎｔＪＰｈｙｓｉｏｌＨｅａｒｔＤＯＩ：１０．１０８９／ａｒｓ．２０Ｊ３．５２０６．ｐａｔｈｗａｙｓａｎｄ４ＺｈａｎｇＳ，ＬａｉＮ，ＬｉａｏＫ，ｅｔａ１．ＭｉｃｒｏＲＮＡ．２１０ｔｉｏｎａｒｉｄａｐｏｐｔｕｓｉｓｂｙｃｙｔｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｅｆｆｅｃｔｓＪ】．Ａｍｒｅｇｕｌａｔｅｓｃｅｌｌｐｒｏｌｉｆｅｒａ．ｉｎＣｉｒｃＰｈｙｓｉｏｌ，２０１ｌ，３０１（４）：Ｈ１５１９一Ｈ１５３０．ｔａｒｇｅｔｉｎｇｒｅｇｕｌａｔｏｒｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎＪｇｌｉｏ．ＤＯＩ：１０．１１５２／ａｊｐｈｅａｒｔ．０１０８０．２０１０．ｂｌａｓｔｏｍａｃｅｌｌｓ『Ｊ］．ＦｏｌｉａＮｅｕｍｐａｔｈｏｌ，２０１５，５３（３）：２３６－２４４．【９ＤＯＩ：１０．５１１４／ｆｎ．２０１５．５４４２４．Ｊ，ｅｌａ１．Ｅｆｆｅｃｌｏｆｄｅｘｍｅｄｅｔｏｍｉｄｉｎｅｏｎｌｕｎｇｉｓｃｈｅ—ｍｉａ．ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎｉｎｊｕｒｙＩＪｆ．ＭｏｌＭｅｄＲｅｐ，２０１４，９（２）：４１９－４２６．ＪｉａｎｇＬ，ＬｉＬ，Ｓｈｅｎｔａｒｇｅｔｓａｎｄｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆａｃｔｉｏｎ［５］陈岱莉，黄晓雷，齐晓非，等．右旋美托咪啶缓解内毒素休克大鼠ＤＯＩ：１０．３８９２／ｍｍｒ．２０１３．１８６７．［１０］ＣａｔＹ，ＸｕＨ，ＹａｎＪ，ｅｔａ１．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ海马炎性反应及认知功能损伤［Ｊ］．中华实验外科杂志，２０１５，３２（４）：７７８－７８０．Ｃｈｅｎｏｆｄｅｘｍｅｄｅｔｏｍｉｄｉｎｅｉｎｏｎｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｉｓｃｈｅｍｉａ／ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎｉｎｉｕｒｙＪＩ．ＤＬ，ＨｕａｎｇＸＬ．９ｉＸＦ，ｅｔａ１．Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｄｅｘｍｅｄｅｔｏｍｉｄｉｎｅｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｒｅｓｐｏｎｓｅｓｈｉｐ—ｒａｔｓＭｏｌＭｅｄＲｅｐ，２０１４，９（５）：１５４２．１５５０．Ｊ，ＸｉａＰ，ｅｔａ１．ＤｅｘｍｅｄｅｔｏｍｉｄｉｎｅａｔｔｅｎｕａｔｅｓｐｏｃａｍｐａｌａｎｄｃｏｇｎｉｔｉｖｅｉｍｐａｉｒｍｅｎｔＥｘｐｉｎＤＯＩ！１０．３８９２／ｍｍｒ．２０１４．２０３４．１１ＧｕＪ，Ｃｈｅｎｒｅｍｏｔｅｌｕｎｇｗｉｔｈｅｎｄｏｔｏｘｉｎ．ｉｎｄｕｃｅｄ７７８－７８０．ＤＯＩ：１０．３７６０／ｃｍａ．ｉ６ＣａｋｉｒＭ．ＰｏｌａｔｓｈｏｃｋｌＪ】．ＣｈｉｎＪＳｕｒｇ，２０１５，３２（４）：ｉｎｊｕｒｙｉｓｓｎ．１００ｌ－９０３０．２０１５．０４．０３８．Ａ．Ｔｅｋｉｎｉｎｄｕｃｅｄｂｙｒｅｎａｌｉｓｃｈｅｍｉａ—ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎｉｎｍｉｃｅ【ＪＩ．ＡｃｔａＡｎ．ａｅｓｔｈｅｓｉｏｌＳｃａｎｄ，２０Ｊｌ，５５（１０）：１２７２—１２７８．Ｓ．ｅｔａ１．Ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｄｅｘｍｅｄｅｔｏｍｉｄｉｎｅａ—ＤＯＩ：ｌＯ．１１１ｒｅｎａｌ１８ｃｈｅｍｌ８ｒｅｐ。ｒ－１／ｉ１３９９＿６５７６．２０１１０２５２６．ｘ．９８１ｎｓｔ０ｘｌｄａｔｌ”８ａｎｄｔｕｂｕｌａ‘ｄａｌｎａｇｅｉｎｄｕｃｅｄｂＹｆｕｓｉｏｎｉｎ（收稿日期：２０１５．１２．２１）………’ｒａｔｓ『Ｊ］．ＲｅｎＦａｉｌ．２０１５．３７（４）：７０４．７０８．・读者・作者・编者・中华医学会系列杂志从２００９年开始标注数字对象唯一标识符数字对象唯一标识符（ｄｉｇｉｔａｌｏｂｊｅｃｔｉｄｅｎｔｉｆｉｅｒ，ＤＯＩ）是对包括互联网信息在内的数字信息进行标识的一种工具。在传统的出版物中，书刊、磁带、光盘都有国际标准编号（ＩＳＢＮ、ＩＳＳＮ、ＩＳＣＮ）及其条形码，作为出版物的唯一标识。这些标识使出版物得到有效的管理，便于读者查找和利用。而网上的文档一旦变更了网址便无从追索。数字信息标注ＤＯＩ如同出版物的条形码，是一个永久和唯一的标识号。随着时间推移，数字对象的某些有关信息可能会有变化（包括存储的物理位置），而ＤＯＩ可让使用者直接由此链接到出版商的数据库、文献、摘要甚至是全文，识别码可以直接指引到出版物的本身，使国内外各种来源、不同物理地址的各种类型的学术信息实现互链互通。ＤＯＩ是一个可供全球期刊快速链接的管理系统，整个系统由国际ＤＯＩ基金会（ＩＤＦ）进行全球分布式管理。随着ＤＯＩ的普及，可以借助其进行相关的科研评价，分析高被引频次作者、单位和论文等相关信息，了解各个领域学术研究的热点、影响和趋势，以及研究者在本研究领域的影响力及最新研究成果。中文和外文资源，－次和二次文献，科技文献和数据通过ＤＯＩ可实现动态的、开放式的知识链接，整体提升包括期刊在内的数字资源的使州率，为读者提供更好的服务。进而逐步提高中国期刊的被引率，整体上提高中周精品期刊在国际Ｅ的影响度和显示度，最终推动并建立一个与世界接轨的、永久的、开放互动、成员主动参与、覆盖主要学术研究信息领域的知识链接系统，推动数字期刊的发展和繁荣。为了实现中华医学会系列杂志内容资源的有效数字化传播，同时保护这些数字资源在网络链接中的知识产权和网络传播权，为标识对象的版权状态提供基础，实现对数字对象版权状态的持续追踪，自２００９年第１期开始，中华医学会系列杂志纸版期刊和数字化期刊的论文将全部标注ＤＯＩ。即中华医学会系列杂志除科普和消息类稿件外，其他文章均需标注ＤＯＩ，ＤＯＩ标注于每篇文章首页脚注的第１项。由ｒ＿｝－华医学会杂志社各期刊编辑部为决定刊载的论文标注ＤＯＩ。参照ＩＤＦ编码方案（美国标准ＡＮＳＩ／ＮＩＳＯＺ３９．８４—２０００）规定，巾华医学会系列杂志标注规则如下：“ＤＯＩ：统一前缀／学会标识．信息资源类型．杂志ＩＳＳＮ．．－ｋ★－ｋ－ｋ一－ｋ★★★．年．期．论文流水号”。即：“ＤＯＩ：１０．３７６０／ｃｍａ．ｊ．ｉｓｓｎ．－ｋ－ｋ－ｋ－ｋ一★女★女．ＹＹＹＹ．ｎｎ．ＺＺＺ”。中华医学会系列杂志标注ＤＯＩ各字段释义：“１０．３７６０”为中文ＤＯＩ管理机构分配给中华医学会系列杂志的统一前缀；“ｃｍａ”为巾华医学会（ＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃａｌＡｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ）缩写；“ｊ”为ｊｏｕｒｎａｌ缩写，代表信息资源类别为期刊；“ｉｓｓｎ．－ｋ★★－ｋ一－ｋ－ｋ★－ｋ”为国际标准连续出版物号（ＩＳＳＮ）；“ＹＹＹＹ”为４位出版年份；“ｎｎ”为２位期号；“ＺＺＺ”为３位本期论文流水号。中华医学会杂志社万方数据