治疗性单克隆抗体的研究进展及其免疫偶联物的抗肿瘤应用

治疗性单克隆抗体的研究进展及其免疫偶联物的抗肿瘤应用＋董增祥，王清清，宋海峰（军事医学科学院放射与辐射医学研究所，北京１００８５０）［摘要】目前正在研究的生物技术药物有ｌ／４是单克隆抗体类药物，治疗性抗体已成为生物制药业发展最快的领域之一，它们用于治疗如肿瘤、移植排斥、自身免疫病、心血管疾病、病毒感染等。在发展初期，鼠源单克隆抗体为人类疾病的研究起到了重大的推动作用，但其存在着严重的不足，单克隆抗体人源化已逐渐成为当前研究的热点。另外，将放射性物质、化疗药物以及生物毒素等与单克隆抗体偶联得到免疫偶联物，这些偶联物被单克隆抗体特异性地导向表达相应抗原细胞的表面，并发挥抗肿瘤效应，同时也降低了药物对正常组织的损伤。文中就有关单克隆抗体人源化的研究进展和抗肿瘤应用进行综述。［关键词］单克隆抗体；人源化抗体；免疫偶联物；肿瘤治疗【中图分类号］Ｒ３９２．１ｌ［文献标识码］Ａ【文章编号】１００３—３７３４（２００８）１５—１２８６一０５ＡｄｖａｎｃｅｓｉｎｔｈｅｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｍｏｎｏｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｉｅｓａｎｄｔｈｅａｎｔｉｔｕｍｏｒａｐｐＩｉｃａｔｉｏｎｓｏｆｔｈｅｉｒｉｍｍｕｎｏｃｏｎｊｕｇａｔｅｓＤＯＮＧＺｅｎｇ—ｘｉａｎｇ，ＷＡＮＧＱｉｎｇ—ｑｉｎｇ，ＳＯＮＧＨａｉ—ｆｂｎｇ（Ｊｈｓｔｉｔｎｔｅ矽Ｒｏｄｉ口ｔ幻ｎＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ａｃｎｄｅｍｙ矽Ｊ｜Ｉｆ以ｉ￡ｎ，ｙ肘ｅｄ如口ｆＳｃ搪ｎｃｅ，Ｂｅ玎ｉ，培ｌ００８５０，Ｃ＾ｉｎ口）［Ａｂｓｔｒａｃｔ］Ａｔｐｒｅｓｅｎｔ，ｍｏｒｅｔｈａｎａｑｕａｒｔｅｒｏｆｂｉｏｔｅｃｈｄｒｕｇｓａｒｅｍｏｎｏｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ．Ｔｈｅｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃａｎ—ｔｉｂｏｄｉｅｓｒｅｐｒｅｓｅｎｔｏｎｅｏｆｔｈｅｆａｓｔｅｓｔｇｒｏｗｉｎｇａｒｅａｓｏｆｔｈｅｂｉｏｐｈａ肿ａｃｅｕｔｉｃａｌｉｎｄｕｓｔｒｙ．Ｔｈｅｙｈａｖｅｂｅｅｎｕｓｅｄｔｏｔｒｅａｔｈｕｍａｎｄｉｓｅａｓｅｓ，ｓｕｃｈａｓｃａｎｃｅｒ，ｔｍｎｓｐｌａｎｔｒＩｅｊｅｃｔｉｏｎ，ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅｄｉｓｅａｓｅ，ｃａｒｄｉｏＶａｓｃｕｌａｒｄｉｓｅａｓｅ，ａｎｄａｎｔｉＶｉｒａｌｐｒｏｐｈｙｉａｘｉｓ．ＭｏｕｓｅｍｏｎｏｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｙｈａｓｇｒｅａｔＩｙｉｍｐａｃｔｅｄｔｈｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆｒｅｓｅａｒｃｈｏｎｈｕｍａｎｄｉｓｅ鹳ｅｓ，ｂｕｔｗｈｉｃｈｈ酗８ｅｒｉｏｕｓｓｈｏｒｔａｇｅｉｎｔｈｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｄｉｓｅａｓｅｓ．Ｎｏｗ，ｈｕｍａｎｎｉｚａｔｉｏｎｏｆｍｏｎｏｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｙｈａｓａｔｔｒａｃｔｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｒｅ８ｅａｒｃｈ．ＩｍｍｕｎｏｃｏｎｊｕｇａｔｅａｇｅｎｔｓｃａｎｂｅｏｂｔａｉｎｅｄｂｙｃｏｕｐｌｉｎｇｔｈｅｒａｄｉｏａｃｔｉＶｅｍａｔｅｒｉａｌｓ，ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙａｇｅｎｔｓａｎｄｂｉｏｔｏｘｉｎｗｉｔｈｍｏｎｏｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｙ．ＴｈｅｃｏｕｐＩｅｄａｇｅｎｔｓｐｒｏｄｕｃｅａｎｔｉｔｕｍｏｒｅｆ玷ｃｔｂｙｄｉｒｅｃｔｉｎｇｍｏｎｏｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｙｔｏｔｈｅｃｅｌｌｓｕｒｆ．ａｃｅｔｈａｔｅｘｐｒｅｓｓｅｓｃｏＩＴｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｎｔｉｇｅｎ．Ｔｈｅｃｏｕｐｌｅｄａｇｅｎｔｓａｌｓｏｄｅｃｒｅａｓｅｔｈｅｄａｍａｇｅｔｏｎｏ咖ａｌｔｉｓｓｕｅｓ．Ｔｈｉｓａｎｉｃｌｅｒｅｖｉｅｗｅｄｔｈｅｒｅｃｅｎｔｐｍｇｒｅｓｓｅｓｉｎｔｈｅ８ｔｕｄｉｅ８ｏｆｍｏｎｏｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｙｈｕｍａｎｉｚａｔｉｏｎａｎｄｉｔｓａｎｔｉｔｕｍｏｒａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ．［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｙ；ｈｕｍａｎｉｚｅｄａｎｔｉｂｏｄｙ；ｉｍｍｕｎｏｃｏｎｊｕｃａｔｅ；ｔｕｍｏｒｔｈｅｍｐｙ１９７５年德围学者ＫｏｈＩｅｒ和英国学者Ｍｉｌｓｔｅｉｎ发病毒感染和器官移植等疾病领域的治疗中…，同时明了杂交瘤技术。他们成功地将骨髓瘤细胞和产生抗体药物的研发正在Ｅ速增长，有１００多种治疗性抗抗体的Ｂ淋巴细胞融合为杂交瘤细胞，这种合成的体正在进行临床试验，５００多种抗体处于临床前研究，杂交瘤细胞稳定、有致瘤性、能产生抗体，其分泌的预计到２０ｌｏ年抗体药物的销售量可达到３００亿美抗体是由识别一种抗原决定簇的细胞克隆所产生的元。另外，当治疗实体性肿瘤时，实际到达肿瘤细胞均一性抗体，故称之为单克隆抗体（简称单抗）。然的抗体药物有限，因此抗体药物需要高效化，抗体药而，尽管单抗推动了生物诊断技术的革命，但由于鼠物和“弹头”偶联而成的“生物导弹”在肿瘤的靶向治源性单抗在人体内逐渐表现出来的毒副作用，使得疗中已经得到应用一’。现对单抗药物的研究进展和单抗的治疗应用一度陷入低谷。近年来，随着分子单抗导向药物抗肿瘤的临床应用予以综述。生物学的发展，鼠抗体人源化改造技术及人源性抗ｌ单抗类药物的研究进展体制备技术的出现，为单抗的治疗应用迎来了新的单抗作为治疗疾病的药物主要基于其固有的生曙光。目前，获得ＦＤＡ批准的抗体药物已经广泛应物学功能包括：补体介导的细胞毒性作用（ｃＤｃ）、用于治疗肿瘤、心血管相关疾病、自身免疫性疾病、抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用（ＡＤｃＣ）、凋亡・基金项目：国家８６３资助项目（２００３ＡＡ２２３４７Ｂ）一１２８６～万　方数据曼！ｉ！！些』！！垩型！！垒！！旦翌ｇ！；螋！！！！！：！！塑！：！！诱导、调理吞噬等。３０年以来，人们一直尝试利用人免疫系统产生人源性单抗来制备特异性强的人源抗体药物，从而治疗肿瘤、感染性疾病及自身免疫性疾病等＂’４】。自从鼠源单抗之后，单抗历经了鼠源性抗体、鼠／人嵌合抗体、人源化抗体、人源性抗体４个发展阶段。１．１嵌合抗体抗体的恒定区是抗体分子结构中免疫原性最强的部位，而决定抗体特异性的足抗体的可变区，因此人抗鼠抗体反应（ＨＡＭＡ）主要由鼠单抗的恒定区所致。而利用ＤＮＡ重组技术将鼠单抗的轻、重链可变区基因插入含有人抗体恒定区的表达载体中，转化哺乳动物细胞表达出人鼠嵌合抗体，嵌合抗体完整地保留了异源单抗的可变区，最大限度地保持了其亲和活性，其人源化程度达到７０％左右＂１，降低了免疫原性。但由于其整个可变区都是异源的，所以嵌合抗体的异源性还很明显，解决ＨＡＭＡ的效果并不理想。１．２人源化抗体由于嵌合抗体异源性仍然很大，因此需要对鼠源抗体进行人源化改造，进一步人源化的方法很多，一是重构抗体，就是互补决定区（ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔａｒｉｔｙｄｅｔｅ珊ｉｎｉｎｇｒｅｇｉｏｎ，ｃＤＲ）移植，将鼠抗体的ＣＤＲ移植到人抗体的相应部位，这样人源化程度可达９０％以上，目前该方法是人源化单抗最常用、最基本的方法。另一种常用的人源化方法是表面重塑技术，即将鼠抗体框架区表面氨基酸的残基（ｓｕ血ｃｅａｍｉｎｏａｃｉｄｒｅｓｉｄｕｅｓ，ＳＡＲ）进行人源化改造。该方法是仅替换与人抗体ｓＡＲ差别明显的区域，在维持抗体活性并兼顾减少异源性基础上选用与人抗体表面残基相似的氨基酸替换。１．３人源性抗体虽然人源化抗体解决了鼠抗体的免疫原性等问题，但生产人源化抗体仍有很大的困难：人源化过程需大量繁复、昂贵的电脑模拟，需取代不同的氨基酸以恢复选择性和亲和力，工作量非常大，并且它总还含有少量鼠源性成分。完全的人源性抗体才是用于治疗的理想抗体，目前它主要通过３种途径来研制：噬菌体显示技术、核糖体展示技术和转基因小鼠制备人源性抗体。噬菌体显示技术于２０世纪９０年代被用于抗体的表达，该方法建立在噬菌体外壳能够特异性表达抗体蛋白片段的基础之上。用基因工程技术可使噬菌体携带随机产生的人抗体蛋白序列，从而可构建具有数ｆ亿不同序列的文库。例如，ＣＡＴ公司声称其噬菌体文库具有的序列数已达１０００亿，用这个文库筛选靶抗原，容易分离与此靶结合的噬菌体。万　方数据史旦堑煎蓥壶！塑！堡筮！！鲞箜！！塑利用该技术可有效地表达Ｆａｂ、单链抗体（ｓｉｎｇｌｅｃｈａｉｎＦｖ，ｓｃＦｖ）及双特异抗体（ｄｉａｂｏｄｙ），这样确定的抗体片段再经历～次体外工程，就能产生具有完整功能的人源性单抗。ＣＡＴ公司用此技术生产了以仅肿瘤坏死因子为靶标的Ｄ２Ｅ７制品，这种单抗可用于治疗类风湿关节炎冲，。核糖体展示技术可以制备大容量抗体库，从而弥补抗体库的库容不足和获得的抗体亲和力不高等缺点。该技术依赖于ｍＲＮＡ、核糖体和抗体蛋白（或多肽）通过非共价结合所形成三联复合体，其在无细胞体系中完成转录和翻译，实现了基因型和表型的偶联，翻译出来的抗体可用抗原进行筛选。由于此技术是一个完全在体外进行转化和筛选的过程，其中的每一步包括所有的复制、扩增、转录、筛选均在体外完成，因此可以构建超大容量的库容，也可以联合使用一些特殊的ＰｃＲ技术。利用核糖体展示技术可以获得高特异性、高亲和力的抗体。转基因小鼠的制备方法中抗体生成过程不是从普通小鼠开始，而是从鼠抗体生成基因被相应人基因所取代的小鼠开始。１９９４年，美国ＣｅｌｌＧｅｎｅｓｙｓ公司和Ｇｅｎｐｈａｎｎ国际公司几乎同时宣布，转摹因小鼠作为生产人源性抗体的载体问世。Ｍｅｎｄｚ于１９９７年成功地建立了人Ｉｇ转基因鼠（Ｘｅｎｏｍｏｕｓｅ），它含编码人Ｉｇ基因位点区１０６ｂｐ的大片段ＤＮＡ。ｘｅｎｏ．ｍｏｕｓｅ实现了鼠体液免疫系统的“人源化”：敲除鼠内源免疫球蛋白编码基因，代之以相应的人免疫球蛋白编码基因，该鼠能识别人体蛋白为异物，从而产生针对该蛋白高亲和力的人抗体。目前，利用该技术已经获得了抗ＥＧＲＦ（表皮生长因子受体）、ａ肿瘤坏死因子和ＣＤ。等完全的人源性抗体川。治疗性抗体的上述４个发展阶段使鼠源性蛋白成分分别从１００％下降至３３％，乃至０％，成为真正的人源性抗体。嵌合抗体在人体内的ｆ∽约为４—５ｄ，人源化抗体的ｔ∽约为３—２４ｄ，重组的人源抗体的ｔ。，：为ｌｌ一２４ｄ哺１。人源化及人源性抗体是目前单抗研究的热点，随着单抗人源化程度的提高、免疫原性的降低和抗原抗体亲和力的增强，人源单克隆抗体在疾病治疗方面的应用将会越来越广泛。２单抗导向药物抗肿瘤的临床应用随着对单抗药物的不断深入研究，如今单抗既可以直接治疗疾病，也可以与“弹头”药物偶联构成免疫偶联物（ｉｍｍｕｎｏｃｏｎｊｕｃａｔｅ），用作“弹头”的物质主要有：放射性核素、化学药物和生物毒素。单抗与一１２８７—鱼！ｉ！！！！』！！婴型垡塑！！旦型墨苎！塑！：！！！：！！！！：！！生旦堑堑盘查！鲤！堡筮！！鲞箜！！塑不同物质偶联其产物分别称为放射免疫偶联物（ｒａ－ｄｉｏｉｍｍｕｎｏｃｏｎｊｕｃａｔｅ）、化学免疫偶联物（ｃｈｅｍｏｉｍｍｕ—ｎｏｃｏｎｊｕｃａｔｅ）和免疫毒素（ｉｍｍｕｎｏｔｏｘｉｎ）。２．１性亲和力的抗体作为载体，携带高活性放射性同位素，进入体内后靶向肿瘤组织，借助放射性同位素的电离辐射效应杀伤肿瘤细胞或抑制其生长，同时又降低了对正常组织的放射性损伤。在临床上应用的放射性核素衰变类型主要为－ｙ衰变、ｐ衰变、瑾衰变和电子俘获（ＥＣ）。常用于放免治疗的核素种类及其物理特性见表ｌ。放射免疫偶联物放射线可以直接作用于ＤＮＡ分子，导致其损伤或断裂，其在生物体内电离水分子产生自由基，自由基再损伤生物大分子，导致细胞损伤，放射性免疫偶联物是利用对肿瘤有特异表ｌ常用于放免治疗的核素种类及其物理特性ＦＤＡ批准的放射免疫药物有治疗非霍奇金淋巴瘤（ＮＨＬ）的托西莫单抗（ｔｏｓｉｔｕｍｏｍａｂ，商品名为Ｂｅｘｘａｒ）是”１Ｉ标记的抗ＣＤ：。单抗，其作用机制类似于利妥昔单抗（ｒｉｔｕｘｉｍａｂ）∽ｊ。ＳｗＯＧ组织¨叫报道使用环磷酰胺．羟基柔红霉素一长春新碱．泼尼松（联合化疗方案）与”‘Ｉ．托西莫单抗联合治疗滤泡性ＮＨＬ患者经自体干细胞移植后，采用本品辅助治疗，结果１例获得完全缓解，３例发生４级血小板减少症，１例发生４级中性粒细胞减少症。此外，Ｂｏｉａｒｄｉ等¨叫报道用９０Ｙ标记的单抗治疗神经胶质瘤等。２．２化学免疫偶联物化学药物可以和抗肿瘤Ｍａｂ进行偶联，给药后偶联物质通过Ｍａｂ的导向作用结合到抗原阳性的肿瘤细胞表面，引发偶联物的内化，相当大的一部分完整的化学药物游离出来通过和ＤＮＡ分子结合发挥其细胞毒作用，从而通过抑制细胞ＤＮＡ或蛋白质合成、干扰破坏细胞核酸或蛋白质功能、抑制细胞有丝分裂等方式来杀伤肿瘤细胞。偶联物常用的化学药物有：顺铂、环磷酰胺、鬼臼乙叉苷、阿霉素、紫杉醇、甲氨蝶呤、长春花碱等。Ｇｅｍｔｕｚｕｍａｂ９０例，其中９０％的患者对治疗有反应，６７％的患者反应良好，２年生存率为８ｌ％。Ｋａｍｉｎｓｋｉ等¨ｕ报道，用１３１Ｉ．托西莫单抗对５９例ＮＨＬ患者进行治疗，结果显示，有４２例（７ｌ％）患者对放射免疫治疗有反应，其中２０例（３４％）反应良好。通过随访，这２０例患者中有７例保持不复发达３—６年。Ｋ锄ｉｎｓｋｉ等Ｈ２１又用”１Ｉ标记的托西莫单抗对７６例进入Ⅲ期或Ⅳ期的滤泡性淋巴癌患者进行治疗研究，用７５ｃＧｙ的¨１Ｉ一托西莫单抗辐射１周，结果显示，９５％的患者对治疗有反应，７５％的患者反应良好。５年多的随访结果显示，５ｌ％的患者５年内表现正常，且日渐好转，５７例表现良好的患者中有４０例在４．３—７．２年内保持缓解状态。Ｖｏｓｅ等。１引报道，给予２３例难治复发的Ｂ细胞淋巴瘤患者用卡氮介、足叶乙苷、阿糖胞苷、马法兰预处理，再给予３０～７５ｃＧｙｏｚｏｇａｍｉｃｉｎ（商品名Ｍｙｌｏｔａｒｇ）是人源化重组的抗ＣＤ”单抗与卡奇霉素（ｃａｌｉｃｈｅａｍｉｃｉｎ）的免疫偶联物，已被ＦＤＡ批准用于复发和耐药的急性淋巴细胞性白血病的治疗ｍ１。卡奇霉素对肿瘤细胞的杀伤能力是多柔比星的１０００倍左右，但其巨大的毒性对正常细胞组织也造成了损伤，因此产生了很大的不良反应。Ｍｙｌｏｔａｒｇ中抗体部分发挥了导向作用，有效地降低了卡奇霉素的系统毒性，同时保留了卡奇霉素强力的抗肿瘤效应，给药后免疫偶联物聚集在ｃＤ，，阳性的白血病细胞表面，随后抗体与ＣＤ，，的结合引发偶联物的内化，被溶菌酶降解，大部分抗菌药游离出来发挥药效。Ｓａｆａｖｙ等。１副将抗表皮生长因子受体单抗Ｅ卜ｂｉｔｕｘ（Ｃ２２５）与紫杉醇偶联后作用于细胞系Ａ４３１，的”１Ｉ－托西莫单抗，结果完全缓解率５７％，短期及长期毒性与单用卡氮介、足叶乙苷、阿糖胞苷、马法兰预处理组相似。随访３８个月，总生存率为５５％。替伊莫单抗（ｉｂｒｉｔｕｍｏｍａｂｔｉｕｘｅｔａｎ，商品名为ｚｅｖａｌｉｎ）是９０Ｙ标记的抗ｃＤ加单抗，可用来治疗滤泡性淋巴瘤和ＮＨＬ‘１４Ｊ。Ｊａｃｏｂｓ等Ｈ纠报道，８例ＮＨＬ一１２８８一万方数据　曼！ｉ！！苎！』竺婴生垡塑！！旦坐ｇ！！！！！：！！！：！！塑！：！！结果显示，偶联药物诱导出２５．２％左右的细胞凋亡，而单纯紫杉醇组、单抗组以及单抗与紫杉醇的简单混合物组几乎未见凋亡发生。实验同时观察到偶联后既不影响紫杉醇本身的抗肿瘤效应，也不降低单抗的抗原结合能力及其原有的生物学功能。２．３免疫毒素免疫毒素类抗肿瘤药物对肿瘤细胞表面抗原具有特异的亲和性，可释放毒素到肿瘤细胞而不伤害正常细胞。一旦毒素进入细胞，则通过抑制蛋白合成或改变信号传递等途径杀死肿瘤细胞。早在２０世纪７０年代，人们就发现了核糖体失活蛋白有抗肿瘤活性，这些毒素常常被看成为制备免疫毒素类抗肿瘤药物的首选毒素¨引。目前，临床用于抗肿瘤制剂的主要毒素有：白喉毒素、相思豆毒素、蓖麻毒素、合成毒素Ｇｅｌｏｎｉｎ、铜绿假单胞杆菌内毒素等。白喉毒素（ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｔｏｘｉｎ，ＤＴ）是白喉杆菌被ｐ噬菌体溶源化后，由ｐ噬菌体ｔｏｘ基因编码合成的外毒素。ＤＴ分子全长５３５ａａ，相对分子质量为５８３３０。完整的ＤＴ分子不具有细胞毒性，蛋白晶体结构可分为３个彼此独立的结构域：Ｎ端ｌ一１９３孤是酶活性区（ｃａｔａｌｙｔｉｃｄｏｍａｉｎ，Ｃ区），２０５—３７８ａａ是跨膜转运区（ｔｒａｎ８ｍｅｍｂｒａｎｅｄｏｍａｉｎ，Ｔ区），３８６—５３５ａａ是细胞膜受体结合区（ｒｅｃｅｐｔｏｒｂｉｎｄｉｎｇｄｏ—ｍａｉｎ，Ｒ区）。白喉毒素类免疫毒素杀灭细胞通过白喉毒素诱导靶细胞的凋亡，白喉毒素的细胞毒性主要是依赖其ｃ区的ＡＤＰ核糖基转移酶活性。其杀细胞作用为ＤＴ的Ｒ区与细胞膜受体结合后，引导细胞内吞，ＤＴ及受体包裹入内吞泡中，进而形成溶酶体小泡。在酸性环境的溶酶体小泡中，Ｔ区变构进而形成通道，协助ｃ区穿过膜，进入胞浆。进入还原性环境的胞浆时，随着二硫键的打开，ＤＴ分离成Ａ、Ｂ两个片段，随后游离的酶活性Ａ片段与核糖体结合，使真核细胞蛋白合成延伸因子失活，最后靶向细胞蛋白合成受阻，细胞凋亡。已报道的研究中，与ＤＴ相连的导向分子有：抗人ＣＤ，抗体ｕｃＨＴｌ［圳与ＦＮｌ８［２ｌ】，抗ＴＦ抗体ＭａｂＢ３／２５与Ｍａｂ．ＨＢ２１（Ｆｖ），抗结肠癌抗体Ｍａｂｌ０８３一１７・ｌＡ以及抗ＧＤ（２）抗体Ｓｃ５Ｆｌｌ旧引等。相思子毒素（ａｂｒｉｎ）是从相思子中分离的一种细胞毒性蛋白，是植物毒素中毒性最强的毒素之一。毒素相对分子质量大约为６ｌ０００一６５０００，由Ａ、Ｂ２条链组成，２条链由１个二硫键相联。Ａｂｒｉｎ对真核细胞的作用主要是完整Ａｂｒｉｎ或片段跨膜转运进入细胞浆，通过Ａ链催化失活核糖体，从而抑制蛋白质合成过程中多肽链的移位，最终因蛋白质合成障万　方数据主旦堑垫盘查！塑！堡星！！鲞蔓！！塑碍导致细胞死亡。ＡｂｒｉｎＡ链与针对人结肠癌胚抗原产生的单抗偶联制备的免疫毒素，在体内外均显示了高度特异性，对于能分泌结肠癌胚抗原的靶细胞的毒性是不存在相应抗原的其他细胞的１６倍旧３１。体外实验表明，该免疫毒素可以有效抑制人结肠癌细胞，５０％的克隆和５０％的蛋白质合成被抑制所需的免疫毒素浓度分别为Ｏ．０９和Ｏ．０６肛ｇ・ｍＬ一，延长免疫毒素的作用时间，克隆抑制达到９６．３％。体内实验表明，该免疫毒素可以完全杀灭移植于裸鼠体内的结肠癌细胞。３展望在抗体的自身改造上为了提高抗原抗体亲和力、降低免疫原性，现今的研究已经从嵌合抗体转向更安全有效的人源性抗体。在提高抗体的效应功能方面，除了抗体免疫偶联物在临床上的应用之外，还包括：改变抗体分子大小、增加抗体亲和力、改进抗体的ＡＤｃＣ或ＣＤＣ效应、改变抗体的药动学、双特异性抗体、抗体一细胞因子融合蛋白等Ⅲ１。此外，在生产方面，为了降低生产成本而提高产量，研究者将抗体基因转移至牛或羊的体内，特异地在乳汁中表达，由于表达量大、易于纯化等特点，转基因动物生产人抗体的技术必将得到广泛应用。总之近年来研究表明，单抗已经在肿瘤、自身免疫性疾病、感染性疾病、器官移植、血液性疾病、变态反应性疾病等方面得到了广泛的应用。随着抗体疗效不断提高，不良反应越来越小，生产工艺不断成熟，单抗类药物必将为全球疾病患者带来更大的希望。［作者简介】董增祥（１９８２一），男，硕士研究生。联系电话：（０１０）６６９３０２５２，Ｅ．ｍａｉｌ：ｄｏｎｇｚ】【２００８＠ｙａｈ∞．ｃｏｍ．ｃｎｏ【通讯作者］宋海峰（１９７２一），男，研究员，硕士研究生导师，主要从事生物技术药物药理学、药代动力学研究。联系电话：（０１０）６６９３０２５９，Ｅ．ｍａｉｌ：８０ｎｇｈｆ＠Ｉｌｉｃ．ｂｍｉ．北．ｃｎ。［参考文献】［１］ＢＲＥＫＫＥ０Ｈ，ｓＡＮＤＬｌＥ１．Ｔｈｅｒａｐｅｕｎｃａｎｔｉｂｏｄｉｅｓｆｂｒｈｕｍａｎｄｉ眈ａ∞５砒ｔｌｌｅｄａｗｎｏｆｔＩＩｅｔＷｅｎ‘ｙ—ｆｉｎ吐ｃｅｎｔｕｒｙ［Ｊ］．Ⅳ口ｆ置即Ｄｎ皤Ｄ沁∞，２００３，２（１）：５２—６２．【２］陈立慧，宋海峰．治疗性人源化单克隆抗体研究进展［Ｊ］．中国新药杂志，２００４。１３（７）：５９０一５９４．［３］Ｖ＾ＲｃＨＥＴＴ＾ｓ，ＧＩＢＥＬＬｌＮ，ＯＬＩＶＩＥＲＯＢ，ｅｌ口ｚ．Ｅｌ蛐咖ｔ￥即ｌａｔｅｄｔｏｈｅｔｅｒｏｇｅｎｅ“ｙｏｆｄｎｔｉｂｏｄｙ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔｃｅｌｌｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙｉｎｐａｔｉｅｎｂｕｎｄｅｒｔｎ峙ｔｕ加ｍａｂｔｌＩｅ‘叩ｙｆｈｐｒｉｍａｒｙｏｐｅｒａｂｌｅｂ他ａｓｔ“毗ｒ＂懈ｐ煳ｉ鸭Ｈｅｒ２［Ｊ】．ｃ口＾ｃ盯Ｒ龆，２∞７．６７（２４）：１１９９ｌ—１１９９９．［４］＾ＤＡＭｓＧＰ，ｗＥｌＮＥＲＬＭ．Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｙｔｈｅｍｐｙｏｆｃａｎｃｅｒ［Ｊ］．胁ｔ口如泖＾，Ｉｏｆ，２００５，２３（９）：１１４７一１１５７．［５］陈志南，刘民培．抗体分子与肿瘤［Ｍ］．北京：人民军医出版一１２８９—垦！ｉ！！丝』！！翌！！丛堕！！望型壁！塑！：！！！：！！塑！：！！社。２００２：ｌ∞一１６３．［６】ＨｏＬＪＭＡＮＮＭ，ｗＡＮｎ’ｓｃＨＫＥＲ，ＨＥＬＩｓｃＨ＾，甜“．Ａｎｔｉ—ＴＮＦ蚰ｔｉｂｏｄｉ曲ｉｎｉｎｔｈｅ７１４６—７１５０．生垦堑垫盘查！塑！生釜！！鲞筮！！塑［１６］Ｂ０ｌＡＲＤＩＡ，ＢＡＲＴＯＬＯＭＥＩＭ，ＳＩＬＶＡＮＩ＾，甜ⅡＺ．Ｉｎｌｒａｔｕｍｏ－ｒａｌｄｅｌｉｖｅｒｙｏｆｔｒ∞ｔｍｅｎｔｏｆｉｎｎ舢ｍａｔｏｒｙｉｎｔ∞ｔｉｎａｌ８ｔｅｎｏｓ髑ｍ“ｏｘａｎｔｍｎｅｉｎ鼬∞ｃｉａｔｉ∞ｗｉｔｈ９０－Ｙ强ｄｉｏｉｍｍｕ—ｃＤｏｈｎ’ｓｄｉｓｅＢ∞［Ｊ】．ｚ白５ｔｎＤ叭衙越，２００３，４ｌ（１）：ＩＩ—１７．Ｉｎｃ［Ｊ］．（ｍｅｍ口如ｆ，［１７］ｎｏｔｈｅｒａｐｙ（ＲＩＴ）ｉｎｍｃｕｒｒｅｎｔｇｌｊｏｂｌ∞￡∞ａ［Ｊ］．Ｊ肌ｕｒｏｏＭｚ，ＹＭ．Ｔｍａｔｍｅｎｔ［７】ｗＥＬＬｓｗ＾．Ｅｅｋ。且ｘｅｎｏｍｏｕｓｅ：＾ｂｇｅｎｉｘ２０００，７（８）：１８５一１８６．２００５，７２（２）：１２５一１３１．ＣＨＥＵＮＣＫＣ。ＷＯＮＧａｃｕｔｅＬＧ．ＹＥＵＮＧｏｆＣＤ３３［８］杨春娥，石小鹏．单克隆抗体类抗肿瘤药物的临床应用和进展［Ｊ］．中国新药与临床杂志，２００５，２４（２）：１３６一１３９．ｐｏｓｉｔｉｖｃ陀ｆ血ｔｏｒｙ［１８］ｌｙｍｐｈｏｂｈ砒ｉｃｌｅｕｋｅｍｉａｗｉｔｌｌＭｙｌｏｔａｒｇ［Ｊ］．ｋ以劬叩＾ｏｍ４，２００８，４９（３）：５９６—５９７．ＳＡＦＡＶＹＡ，ＢＯＮＮＥＲ［９］魏莉，罗荣城．放射性核素标记抗ｃＤ２０单克隆抗体治疗Ｂ细胞淋巴瘤的研究进展［Ｊ］．国际放射医学核医学杂志。２００６，３０（３）：１５３一１５７．ＪＡ，ＷＡＫＳＡＬＨＷ，ｄ耐．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓｐ卵ｌｉｔ麟ｅｌ—Ｃ２２５ｃｏｎｊｕｇａｔｅ∞－ｍｏｄｅｌａｎｄｆｏｒｂｉｏＩｏｇｉｃ“ｅｖａｌｕａｔｉｏｎｔａｒｇｅｔｅｄｏｆｄｍｇｄｅｌｉｖｅｆｙ［Ｊ］．占ｆＤｃｏ啦‘ｇ∞ｅｍ，２００３，１４（２）：ｅ妇ｃｅｃｔ［１０］ＰＲＥｓｓＯｗ，ｕＮＧＥＲＪＭ，ＢＲＡｚＩＥＬｃｈｅｍｏｔｈｅｍｐｙｆｏＵｏｗｅｄｂｙｆ打ｐ”ｖｉｏｕｓｌｙＲＭ，村口ｚ．Ａｐｈａｓｅ２ｔｒｉａｌｔｏｓ－３０２—３ｌＯ．ｏｆＣＨＯＰｉｔｕｍｏｍａｂｔｏｓｉｔｕｍｏｍａｂ／ｉｏｄｉｎｅ儿３ｌ［１９］ＲＡＭＮＡＴＨａｂＴｉｎｏｎＶ，ＫＵＴｒＡＮＧ，ＫＵＴｒＡＮＲ．Ａｎｔｉｔｕｍｏｒｏｆｕｎｔ糟ａｔｅｄｆｏＵｉｃｕｌ盯ＧｒｏｕｐＰｍｔｏｃｏｌｎｏｎ—Ｈｏｄｇｋｉｎｌｙｍ－ｔｍｎ８ｐ１８ｎｔｅｄｔｕｍｏ措ｉｎｍｉｃｅ［Ｊ］．州缸ｎ．，鼬”如ｚＰ＾口ｒ－ｐｈｏｍ８：ｓｏｕｔｈｗｅｓｔ０ｎｃｏｌｏｇｙｓ９９ｌｌ［Ｊ］．ｍ∞ｄ，［２０］ｍⅢＺ，２００２，４６（１）：６９—７７．ＷＯＯＪＨ，ＬＩＵＪＳ，ＫＡＮＣＳＨ，“耐．ＧＭＰｐｍｄｕｃｔｉｏｎａｃｔｅｒｉ黯ｔｉｏｎｏｆｔｈｅｂｉｖａｌｅｎｔａｎｔｉ－ｈｕｍａｎｐｈａ５ｅＴＩ／ＩＩａｎｄｃｈａｒ－２００３，１０２（５）：１６０６一１６１２．［１１］ＫＡＭＩＮｓＫｌＭｓ，ＥｓＴＥｓＪ，ｚＡｓＡＤＮＹｔｏｓｉｔｕｍｏｍａｂＫＲ。“口ｆ．Ｒａｄｉｏｊｍｍｕｎｏ・ｏｒｃｅＵｉｍｍｕｎｏｔｏｘｉｎ．ｔｈｅｍｐｙｗｉｔｈｉｏｄｉｎｅ‘３１ＩｃｅＵｆｏｒ弛ｌａｐＢｅｄｒｃｆｍｃｔｏｒｙＢ—Ａ—ｄｍＤＴ３９０－ｂｉｓＦｖ（ｕｃＨＴｌ）ｆｏｒｃＩｉｎｉｃａｌ砸ａｌｓ［Ｊ］．ｎｏｎ—ＨｏｄｇｋｉｎｏｆｔｌｌｅＩｙｍｐｈｏｍａ：ｕｐｄａｔｅｄｍ８ｕｌ协肌ｄｌｏｎｇ—ｔｅ珊ｆ札一ｅｘｐｅｒｉｅｎｃｅ［Ｊ］．口‰ｄ，［２１］Ｐ删ｅ伽脚ｒＰ＂喱＾２００８，５８（１）：ｌ—１１．ＧＡＮＳＵＶＤＢ，ＡＳＩＥＤＵｌｏｗ一“ｐｕｎｉｖｅ措ｉｔｙｏｆＭｉｃｈｉｇａｎＣＫ，ＧＯＯＤＷＩＮＪ，以一．Ｅｘｐａｎｅｉ伽ｏｆＴｃｅｕ８ｆ如ｍｒｂｅｓｕｓｍａｃａｑｕｅｐｅ—Ｄｙｎａｌ２０００，９６（４）：１２５９一１２６６．ｃＤ，ｃＤ矗８ｕｐｐｒｅｓｓｉＶｅ陀印ｌａｔｏｒｙｔｈｅｍｐｙ鹪ｉｎｉｔｉａｌ［１２］ＫＡＭＩＮｓＫＩｔ”ａｔｍｅｎｔｆｏｒＭｓ，ＴｕｃＫＭ．１３１Ｉ．ｔｏｓｉｔｕｍｏｍａｂｒｉｐｈｅｒａｌｂｌ∞ｄｂｙＦＮｌ８／蚰ｔｉｈｕｍ蛐ＣＤ２８一ｃｏａｔｅｄｂｅａｄｓｆｏＵｉｃｕＩ＂ｌｙｍｐｈ∞ａ［Ｊ］．ＪＩｖＥｑ∥Ｊ材甜，２００５，３５２［２２ｊ［Ｊ］．肌ｍ，ｍｍｕｎｏｆ，２００ｒ７，６８（６）：４７８—４９０．ＴＨＯＭＡＳＰＢ，ＤＥＬＡＴＴＥｇｅｔｅｄ（５）：“ｌ一４４９．［１３］ＶｏｓＥＳＪ，ＳＵＴＰＨＩＮＡ，矗越．Ｅ自ｆｅｃｔｉｖｅｔａｒ－ＪＭ，ＢＩＥＲＭＡＮＰＪ，ＥＮＫＥｃ，科越．Ｐｈ聃ｅＩ试ａｌ“ｉｏ－ｔｏｓｉｔｕｍｏｍａｂｗｉｔｌＩｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙｏｆｎｅｕｍｂｌａｓｔｏｍａｃｅｌｌ８［Ｊ］．ＪＰｅｄ谊打ｓｕｒｇ，ｄｉｎｅ－１３ｌｈｉｇｈ・ｄｏ∞ｃｈｅｍｏ山ｅｍｐｙｆｏｒ弛Ｉａｐ神ｄａｎｄａｕｔｏｌｏ—２００２，３７（３）：５３９—５４４．Ｓｏｕｓ８ｔｅｍ—ｃｅＵｔ饱ｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎｎｏｎ－Ｈｏｄｇｋｉｎ’ｓｌｙｍｐｈｏ—［２３］ＴＳＡＩＬＣ，ＣＨＥＮｍａｎＹＬ，ＬＥＥＣ，ｅｔ口ｆ．Ｇｍｗｔｈ８ｕｐｐｎ，ｓｓｉｏｎｉｎｎｕｄｅｍｉｃｅｂｙｏｆｈｕ・ｍａ［Ｊ］．，ｃ“ｎ［１４］ｗＥＩＱＥＲＴｄ８ｔｉｏｎｅＤ唧ｚ，２００５。２３（３）：４６Ｉ一４６７．Ｔ，ＨＩＤＤＥＭＡＮＮｃｏｌｏ”ｃｔａｌｃ眦ｉｎ嘲ａｍｏｎｏｃｌｏｎａＩａｎｔｉｂｏｄｙ０，ＩＬＬＩＤＱＥｗ，硝口ｚ．Ｒｅｃｏｍｍｅｎ—ｔｉｕｘｅｔ８ｌｌｉｎｃ２７吨ｂｒｉｎＡｃｈａｉｎｃｏｎｊｕ学Ｂｔｅ［Ｊ］．Ｄｂｃｏ如ｎ胁“ｍ，１９９５，３８ｆ打ｔｌｌｅｕ∞ｏｆ”ｔｒｉｕｍ－９０ｉｂ—ｔｕｍｏｍａｂｍａｌｉｇ・（１０）：１０６７一１０７４．ｎ∞ｔｌｙｍｐｈｏｍａ［Ｊ］．ｃ口Ｍ，２００６，１０７（４）：６８６—６９５．［１５］ＪＡｃＯＢｓｓＡ，ｖＩＤＮ０ｖＩＣＮ。ＪＯＶｃＥＪ，日ｏｆ．Ｆｕｕ．ｄｏｓｃ帅Ｙｉｂｒｉｔｕｍｏｍａｂｔｉｕｘｅ掘ｎｔｈｃ腿ｐｙｉｓＢａｆｅｉｎｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｐｒｉｏｒ［２４］沈倍奋．治疗性抗体的改造［Ｊ］．医学分子生物学杂志，２００６，３（４）：２４５—２４９．ｍｙｅｌ∞・ｂｌａｔｉｖｅｃｈｅｍｏｔ｝Ｉｅｍｐｙ［Ｊ］．ｃｈＣｄ厅ｃ盯脑，２００５，ｌｌ（１９）：编辑：杨青／接受日期：２００８一０４—２０舢．“．址—．Ｌ．址皿舢“．址“．址．址．‘．Ｌ．址．址“““舢．扯舡耻—止舢舢皿．址．址且．址舢轧“舢．扯．址舢４Ｌ—止舢—止舢舢．址“．址—．Ｌ舢．‘‘（上接第１２８２页）药品种保护条例》修订、完善标准体系建设等工作。此外，在新医改政策、全民医保等诸多因素的推动下，必将对企业的药品研发以及药品注册申请工作产生积极的影响，推动我国药品行业健康、稳步发展。［作者简介】张华吉（１９７２一），男，工程师，主要从事医药信息管理工作。联系电话：（０ｌＯ）８８３３００９ｌ，Ｅ—ｍａｉｌ：ｓｆｄａ３８０３＠１６３．ｃｏｍ。新药注册批件中，抗微生物药位居首位，共３８件占总新药批件量的２３．９０％，其次是消化系统用药和循环系统用药各２１件（各占１３．２１％），之后是中枢神经系统１３件（占８．１８％），诊断药物（含诊断试剂）１２件（占７．５６％）。仿制药注册批件中，仍以抗微生物药居多，共１８３件，占仿制药批件量的３０．５５％，其次是中枢神经系统用药１０９件（占１８．２０％），再次是消化系统用药７ｌ件（占１１．８５％），之后是循环系统用药４ｌ件（占６．８４％）。２００８年全国药品注册工作会议明确了２００８年药品注册工作重点，即：重点解决过渡期积压品种的审评审批、清查文号、启动药品再注册审批、制订和发布《药品注册管理办法》配套规章和规定、继续开展《中一１２９０一【参考文献】陈新谦。金有豫，汤光．新编药物学［Ｍ］．第１６版．北京：人民卫生出版社，２００７．［２】国产药品品种数据库［ＥＢ／ｏＬ】．［２００８一０３一０１］．ｈｔｔｐ：／／ｗ＇州．ｃｐｉ．学ｏｖ．ｃｍ７ｄｅｍｏ／试ｐ．ｈｔｍｌ．［３］全国药品注册管理工作会议在合肥召开［ＥＢ／０Ｌ］．［２００８—０３一∞］．ｈＩｔｐ：／／ｗｗｗ．ｓｆｄａ．８Ｄｖ．ｃｎ／ｗＳ０１／ｃＬ００５０／２８３０５．ｈｔｍｌ．编辑：王字梅／接受日期：２００８一０６—２０万方数据