腹腔注射IL_2对小鼠单核吞噬细胞吞噬功能的影响_姚春艳

󰀁文章编号:󰀁1007-6611(2007)03-0202-02

󰀁山西医科大学学报(JShanxiMedUniv)2007年3月,38(3)󰀁

腹腔注射IL󰀁2对小鼠单核吞噬细胞吞噬功能的影响

姚春艳1,󰀁姜丽娜2,󰀁郭术俊1,󰀁马󰀁华1󰀁(1蚌埠医学院免疫学教研室,󰀁蚌埠󰀁233003;󰀁

生理学教研室)

摘要:󰀁目的󰀁观察不同浓度IL󰀁2对小鼠单核吞噬细胞吞噬功能的影响。󰀁方法󰀁取20只健康昆明小鼠随机分为五组:正常对照组和4个不同浓度的实验组。将浓度分别为20,40,80和160U/ml的IL󰀁2(实验组)经腹腔注入小鼠体内,观察小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬能力,计算出不同浓度IL󰀁2作用后吞噬细胞的吞噬百分率和吞噬指数,并与正常对照组作比较。󰀁结果󰀁正常对照组小鼠巨噬细胞吞噬百分率为(16.98󰀁1.22)%,20U/ml组为(39.66󰀁0.98)%,40U/ml组为(57.61󰀁1󰀁04)%,80U/ml组为(60.22󰀁1.32)%,160U/ml组为(61.11󰀁0.99)%;吞噬指数依次为0.21󰀁0.048,0.52󰀁0󰀁032,0.79󰀁0.041,0.82󰀁0.057和0.83󰀁0.028。实验组与正常对照组之间具有显著性差异(P<0.05)。󰀁结论󰀁腹腔注射IL󰀁2可以显著增强小鼠单核吞噬细胞的吞噬功能。关键词:󰀁IL󰀁2;󰀁单核吞噬细胞;󰀁吞噬功能中图分类号:󰀁R392.3󰀁󰀁󰀁文献标识码:󰀁A

InfluenceofintraperitonealinjectionofIL󰀁2onmononuclearphagocytephagocytosisinmice

YAOChun󰀁yan,JIANGLi󰀁na,GUOShu󰀁jun,etal(DeptofImmunology,BengbuMedicalCollege,Bengbu233003,China)Abstract:󰀁Objective󰀁TostudytheinfluenceofdifferentconcentrationsofIL󰀁2intraperitoneallyinjectedintomiceonmononuclearphagocytephagocytosis.󰀁Methods󰀁Twentyhealthymiceweredividedintofivegroupsrandomly:normalcontrolgroupandfourex󰀁perimentgroups.Themicewereintraperitoneallyinjectedwith20,40,80and160U/mlIL󰀁2infourexperimentgroups,respectively.Themononuclearphagocytephagocytosiswasobserved,andphagocyticpercentageandphagocyticindexwerecalculated.󰀁Results󰀁Thephagocyticpercentageswere(16.98󰀁1.22)%innormalcontrolgroup,and(39.66󰀁0.98)%,(57.61󰀁1.04)%,(60󰀁22󰀁1󰀁32)%,(61.11󰀁0.99)%inexperimentgroups,respectively.Thephagocyticindexwas0.21󰀁0.048innormalcontrolgroup,and0.52󰀁0.032,0.79󰀁0.041,0.82󰀁0.057and0.83󰀁0.028inexperimentalgroups,respectively.Therewassignificantdif󰀁ferencebetweenexperimentgroupsandnormalcontrolgroup(P<0.05).󰀁Conclusion󰀁InjectingintraperitoneallyIL󰀁2intomicecansignificantlystrengthenmononuclearphagocytephagocytosis.Keywords:󰀁interleukin󰀁2;󰀁mononuclearphagocyte;󰀁phagocytosis

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安徽蚌埠医学院病理

󰀁󰀁巨噬细胞是一类参与免疫反应的细胞,在调节淋巴细胞和免疫应答中起着重要作用。当外来生物大分子或有害异物进入机体时,巨噬细胞就会向异物存在处集合,进行吞噬活动,吞噬后形成吞噬泡,在细胞内与初级溶酶体融合,将吞噬物消化分解,从而发挥细胞免疫作用[1]。

白细胞介素(IL)是非常重要的细胞因子家族,它们在免疫细胞的成熟、活化、增殖和免疫调节等一系列过程中均发挥重要作用。其中IL󰀁2不仅可以刺激T细胞、B细胞的生长,诱导细胞毒作用,当它持续作用于单核-巨噬细胞后,其抗原递呈能力、吞噬力、杀菌力,细胞毒性均明显增强,分泌某些细胞因子的能力也得到加强。目前应用IL󰀁2治疗某些疾病,特别是对肿瘤治疗的研究得到了广泛应用,单独使用IL󰀁2或与LAK细胞等联合使用治疗肿瘤取得了一定的疗效;还有望用于病毒感染,

免疫缺陷病及自身免疫病的治疗[2]。本实验通过腹腔注射不同浓度IL󰀁2,测定小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬百分率和吞噬指数,方法和结果如下。

1󰀁材料与方法

1.1󰀁动物󰀁健康昆明种小鼠20只,体重约(20󰀁2)g,雌雄各半。

1.2󰀁6%可溶性淀粉肉汤󰀁在肉汤培养基100ml中加入可溶性淀粉6g,经煮沸灭菌30min,置4󰀁冰箱保存备用。

1.3󰀁鸡红细胞悬液(CRBC)󰀁用肝素抗凝鸡血置于Alserver保存液中,用PBS调整鸡红细胞数为(5-6)󰀁105个/ml,置4󰀁冰箱保存备用。

1.4󰀁IL󰀁2󰀁购于长春长生基因药业股份有限公司生产的注射用重组人白细胞介素-2,10万IU/支,加无菌生理盐水配制成20,40,80和160U/ml,4

󰀁山西医科大学学报(JShanxiMedUniv)2007年3月,38(3)󰀁󰀁冰箱保存备用。

1.5󰀁不同浓度IL󰀁2对小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞功能的影响󰀁参照文献[3]的方法加以修改。取体重约(20󰀁2)g的健康昆明小鼠20只,雌雄各半,随机分成五组,第一组为正常对照组,其余四组为实验组,每组4只小鼠。每只小鼠经腹腔内注射6%可溶性淀粉肉汤1ml,48h后,对照组腹腔内再注射鸡红细胞悬液1ml。15min后,用颈椎脱臼法处死小鼠。剖开小鼠腹腔,取腹腔液涂片,自然干燥后瑞氏染色,高倍镜下观察计数。其余四组实验组腹腔注射6%可溶性淀粉肉汤1ml48h后,再经腹腔注入浓度分别为20,40,80和160U/ml的IL󰀁2各1ml,注射后2h再注射鸡红细胞悬液1ml,余下步骤与对照组相同。

1.6󰀁统计学分析󰀁所有数据用(x󰀁󰀁s)表示,采用方差分析,P<0.05表示差异有显著性。2󰀁结果

正常对照组和4个实验组小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞功能结果见表1。方差分析结果表明不同浓度的IL󰀁2实验组与正常对照组的吞噬百分率,吞噬指数均有显著性差异(P<0.05)。

表1

不同浓度IL󰀁2对小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞功能的影响󰀁(n=4,󰀁x󰀁s)

Tab1InfluenceofdifferentconcentrationsofIL󰀁2onphago󰀁

cytosisinmice󰀁(n=4,x󰀁󰀁s)组别正常对照组20U/ml40U/ml80U/ml160U/ml

吞噬百分率(%)󰀁16.98󰀁1.2239.66󰀁0.98*57.61󰀁1.04*60.22󰀁1.32*61.11󰀁0.99*

*

󰀁203󰀁

产生具有抗肿瘤活性的LAK细胞和TIL细胞。正是由于它的这些功能,目前IL󰀁2已广泛用于肿瘤的治疗。

󰀁󰀁从本实验中我们可以看出正常对照组与4个实验组小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬百分率和吞噬指数具有显著性差异,从而验证了IL󰀁2确实可以增强单核吞噬细胞的吞噬能力。而且吞噬百分率和吞噬指数增加的趋势表现为:随IL󰀁2浓度的增加而逐渐上升,到了一定浓度即达到平台期不再上升。可见IL󰀁2增强单核吞噬细胞吞噬能力的这一功能只局限在一定的浓度范围之内,超过此浓度,吞噬力的功能就不再随IL󰀁2的增强而增加。所以IL󰀁2功能的发挥与其浓度有着密切的关系,在应用之前摸索出最适浓度不仅可以最大限度地发挥功能,还可减少因用量过大而造成的副作用。

参考文献:

[1]󰀁黄清松.HBV󰀁STF对小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞功能的影响

[J].广东药学院学报,1997,13(2):129.

[2]󰀁陶义训.免疫学和免疫学检验[M].2版.北京:人民卫生出版

社,1997:54.

[3]󰀁黄清松,邹燕,林元藻,等.鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)对小鼠单

核吞噬细胞吞噬功能的影响[J].广东药学院学报,2005,21(5):585-586.

[4]󰀁周光炎.免疫学原理[M].上海:上海科学技术文献出版社,

2002:87.

[4]

吞噬指数

󰀁󰀁0.21󰀁0.048

0.52󰀁0.032*0.79󰀁0.041*0.82󰀁0.057*0.83󰀁0.028*

󰀁󰀁与正常对照组比较,

P<0.05

󰀁󰀁从4个实验组可见小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬百分率和吞噬指数是随IL󰀁2浓度的增加而呈逐渐上升的趋势,40U/ml浓度之前上升趋势较快,之后逐渐趋于平缓,见图1。3󰀁讨论

IL󰀁2不仅可以刺激T细胞、B细胞的生长,诱导细胞毒作用,增强单核-巨噬细胞的抗原递呈能力、吞噬力、杀菌力,还可激活NK细胞和T细胞,

作者简介:󰀁姚春艳,女,1978-02生,在读硕士,助教.

[收稿日期:󰀁2006-11-21]