２０１１年第１５卷第３期 实用临床医药杂志 Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃ１ｉｎｉｃａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ｉｎ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ・１５・ 红花注射液对大鼠脊髓损伤后继发性水肿的影响 田小武，陈剑峰 （南京中医药大学无锡附属医院脊柱脊髓科，江苏无锡，２１４００１） 摘要：目的探讨大鼠脊髓损伤（ＳＣＩ）后，红花注射液对脊髓继发性水肿的影响。方法将１８只ＳＤ大鼠随机分为假手 术组（Ａ组），脊髓打击损伤组（Ｂ组）、红花溶液组（Ｃ组），每组６只。Ｂ组根据改良的重物撞击装置制备脊髓急性打击损伤动 物模型，Ｃ组在脊髓打击损伤后进行腹腔注射红花溶液１００ ｍｇＡｇ。观察并检测３组大鼠ＳＣＩ后１、２４、４８ ｈ ３个不同时间点后 肢运动功能评分变化以及脊髓组织病理学、组织含水量。结果术后Ａ组大鼠功能完全恢复；Ｃ组与Ｂ组相比，大鼠后肢运动 功能２４、４８ ｈ ２个时间点均有所改善，但２４ ｈ时已出现明显差异（Ｐ＜０．０５），４８ ｈ时差异更为显著（Ｐ＜０．０１）。ｓｃＩ后Ｂ、Ｃ各 组的损伤段组织含水量均与Ａ组有明显差异（Ｐ＜０．０５）；ＳＣＩ后２４ ｈ时Ｃ组与Ｂ组相比明显较低（Ｐ＜０．０５），４８ ｈ差异更显 著（Ｐ＜０．叭）。结论红花注射液能通过抑制脊髓继发性水肿，促进ＳＣＩ后的组织功能恢复。 关键词：红花注射液；脊髓损伤；继发性水肿；大鼠 中图分类号：Ｒ ３２２．８１ 文献标志码：Ａ 文章编号：１６７２—２３５３（２０１ １）０３－００１５—０３ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｓａｆｆｌｏｗｅｒ ｏｎ ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ ｉｎｊｕｒｙ ｉｎ ｒａｔｓ ＴＩＡＮ Ｘｉａｏ～ＷＵ，ＣＨＥＮ Ｊｉａｎ—ｆｅｎｇ （Ｗｕｘｉ Ｈｏｓｐｉｔａｌ Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ ｔｏ Ｎａｎｊｉｎｇ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｗｕｘｉ，Ｊｉａｎｇｓｕ，２１４００１） ＡＢ ＡＣＴ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｓａｆｆｌｏｗｅｒ ｏｎ ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ ｓｅｃｏｎｄａｒｙ ｅｄｅｍａ ａｆｔｅｒ ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ ｉｎｊｕｒｙ ｉｎ ａｄｕｌｔ ｒａｔｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｅｉｇｈｔｅｅｎ ＳＤ ｒａｔｓ ｗｅｒｅ ｒａｎｄｏｍｌｙ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏ ３ ｇｒｏｕｐｓ： Ｓｈａｍ—ｏｐｅｒａｔｉｏｎ ｇｒｏｕｐ（ｇｒｏｕｐ Ａ），ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ ｉｎｊｕｒｙ ｇｒｏｕｐ（ｇｒｏｕｐ Ｂ），ａｎｄ ｓａｆｆｌｏｗｅｒ ｇｒｏｕｐ（ｇｒｏｕｐ Ｃ）．Ａｎｉｍａｌ ｍｏｄｅｌｓ ｏｆ ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ ｉｎｊｕｒｙ ｗｅｒｅ ｉｎｄｕｃｅｄ ｗｉｔｈ ｗｅｉｇｈｔ—ｄｒｏｐｐｉｎｇ ｍｅｔｈｏｄ．Ｉｎ ｇｒｏｕｐ Ｃ， Ｓａｆｆｌｏｗｅｒ ｏｆ １００ ｍｇ／ｋｇ ｗａｓ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ ｉｎｊｅｃｔｅｄ ｔｈｒｏｕｇｈ ａｂｄｏｍｅｎ ｉｍｍｅｄｉａｔｅｌｙ ａｆｔｅｒ ｍｏｄｅｌｉｎｇ． Ｔｈｅ ｌｏｃｏｍｏｔｏｒ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｈｉｎｄ ｌｉｍｂｓ．ｔｈｅ ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ａｎｄ ｔｉｓｓｕｅ ｗａｔｅｒ ｏｎｔｃｅｎｔ ｃｈａｎｇｅｓ ｉｎ ｔｈｅ ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ ｗｅｒｅ ｏｂｓｅｒｖｅｄ １ ｈ，２４ ｈ ａｎｄ ４８ ｈ ａｆｔｅｒ ｍｏｄｅｌｉｎｇ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｈｉｎｄ ｌｉｍｂ ｌｏｃｏｍｏｔｏｒ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｒａｔｓ ｉｎ ｇｒｏｕｐ ｃｏｍｐｌｅｔｅｌｙ ｒｅｃｏｖｅｒｅｄ．Ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈａｔ ｉｎ ｇｒｏｕｐ Ｂ，ｔｈｅ ｈｉｎｄ ｌｉｍｂ ｌｏｃｏｍｏｔｏｒ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ ｒａｔｓ ｉｎ ｇｒｏｕｐ Ｃ ｉｍｐｒｏｖｅｄ ａｆｔｅｒ ２４ ｈ ａｎｄ ４８ ｈ，ｗｉｔｈ ｏｂｖｉｏｕｓｌｙ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｉｍ— ｐｒｏｖｅｍｅｎｔ ａｆｔｅｒ ２４ ｈ（Ｐ＜０．０５）ａｎｄ ｍｏｒｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ａｆｔｅｒ ４８ ｈ（Ｐ＜０．０１）．Ｉｎ ｇｒｏｕｐ Ａ， ｔｈｅ ｔｉｓｓｕｅ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｗａｓ ｗｅｌ１ ｐｒｅｓｅｒｖｅｄ．Ｉｎ ｇｒｏｕｐ Ｂ．ｔｈｅ ｎｅｒｖｅ ｔｉｓｓｕｅ ｓｈｏｗｅｄ ｍｕｌｔｉｆｏｃａｌ ｌｅｕｋｏｅｎ— ｃｅｐｈａｌｏｐａｔｈｙ ｂｌｅｅｄｉｎｇ ａｎｄ ａ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｎｅｒｖｅ ｃｅｌｌｓ ｄｉｓａｐｐｅａｒｅｄ．Ｔｈｅ ｎｕｃｌｅｕｓ ｂｅｃａｍｅ ｓｍａｌｌ ｂｅｃａｕｓｅ ｏｆ ｐｙｃｎｏｓｉｓ．Ｉｎ ｇｒｏｕｐ Ｃ，ｔｈｅ ｉｎｊｕｒｙ ｏｆ ｔｈｅ ｎｅｒｖｅ ｔｉｓｓｕｅ ｗａｓ ｍｉｌｄ，ｔｈｅ ｃｅｌｌｓ ａｐｐｅａｒｅｄ ｓｗｅｌｌｉｎｇ ａｎｄ ｔｈｅ ｃｙｔｏｐｌａｓｍ ｗａｓ ｈｏｍｏｇｅｎｅｏｕｓ．Ｔｉｓｕｅ ｗａｔｅｒ ｃｏｎｔｅｎｔ ｉｎ ｇｒｏｕｐ Ｂ ａｎｄ Ｃ ａｌｌ ａｒｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｉｎ ｇｒｏｕｐ Ａ（Ｐ＜０．０５）ａｆｔｅｒ ｍｏｄｅｌｉｎｇ．Ａｎｄ ｔｉｓｓｕｅ ｗａｔｅｒ ｃｏｎｔｅｎｔ ｉｎ ｇｒｏｕｐ Ｃ ｉｓ ｌｏｗｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｉｎ ｇｒｏｕｐ Ｂ ａｔ ２４ ｈ（Ｐ＜０．０５），ｅｖｅｎ ｍｏｒｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｌｏｗｅｒ ａｔ ４８ ｈ（Ｐ＜０．０１）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｓａｆ～ ｆｌｏｗｅｒ ｃａｎ ｐｒｏｍｏｔｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｏｆ ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｔｈｒｏｕｇｈ ｄｅｐｒｅｓｓｉｎｇ ｓｅｃｏｎｄａｒｙ ｅｄｅｍａ ａｆｔｅｒ ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ ｉｎｉｕｒｙ． ＫＥＹ ＷＯＲＤＳ：ｓａｆｆｌｏｗｅｒ；ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ ｉｎｊｕｒｙ；ｓｅｃｏｎｄａｒｙ ｅｄｅｍａ；ｒａｔｓ 脊髓损伤（ＳＣＩ）为脊柱疾病和脊柱骨折的严 重并发症。近年来，随着交通、工伤事故的增多， 收稿日期：２０１０—１２—２６ 脊髓损伤的发生率逐年增高，并且ＳＣＩ导致多种 并发症。红花系菊科植物红花的花冠，是传统的 基金项目：江苏省无锡市社会发展指导性计划项目（ＣＬＺ００６２５） ・ １６ ・ 实用临床医药杂志 第１５卷 活血化瘀类中药，其主要有效成分存在于水溶性 部分ｌ川。红花具有扩张血管、增加血流量、改善 微循环作用ｌ＿２ ；也能明显减轻脑卒中引起的脑水 肿 Ｊ。但是对红花应用于ＳＣＩ方面的影响研究 较少，本实验从脊髓组织含水量初步探讨红花对 脊髓继发性水肿损伤的治疗效果。 １实验材料与方法 １．１材料 ＳＤ大鼠１８只，体质量２８０～３２０ ｇ，雌雄不 限，由南通大学实验动物中心提供。红花注射液 （山西省亚宝药业集团股份有限公司）。 １．２ 方法 １．２．１ 动物模型制备：１％戊巴比妥钠４０ ｒａｇ／ 腹腔麻醉，俯卧位固定，胸背部剃毛备皮、常规 消毒，在Ｔ８棘突中心作长约３ ｃｍ切口暴露硬脊 膜，圆柱状金属棒沿导管垂直、自由落下，损伤力 度为１０ ｇ×２．５ ｃｍ。造成大鼠脊髓不完全损伤， 致伤后迅速移开打击物，０号线逐层缝合。模型 成功的判定标准：打击后，损伤处脊髓出血、水肿， 大鼠出现摆尾反射，双下肢及躯体回缩样扑动，麻 醉清醒后双下肢呈弛缓ｌ生瘫痪。术后即刻给予青 霉素注射液５万单位预防感染，每天１次，持续２ ｄ。 １．２．２实验分组：将大鼠随机分成３组，每组６ 只，假手术组（Ａ组）：仅行手术暴露，但不给予打 击及治疗；脊髓打击损伤组（Ｂ组）：打击后给予等 量生理盐水作为对照；红花溶液组（Ｃ组）：打击后 即刻给予腹腔注射红花注射液１００ ｍｇ／ｋｇ，每隔 １２ ｈ给药１次。损伤１、２４、４８ ｈ后进行神经功能 评分及标本的取材、检测。 １．２．３ 神经功能评价：采用ＢＢＢ（ｔｈｅ Ｂａｓｒａ Ｂｅａｔｔｉｅ Ｂｒｅｓｎａｈａｎ ｌｏｃｏｍｏｔｏｒ ｒａｔｉｎｇ ｓｃａｌｅ，ＢＢＢ）分 级法对３组动物在１、２４、４８ ｈ的３个时相点后肢 运动功能进行评估。评分标准：第一部（０～７分） 评判动物后肢各关节活动；第二部（８～１３分）评 判动物后肢的步态和协调功能；第三部（１４～２１ 分）评估动物运动时爪子的精细运动，３项满分２１ 分，后肢全瘫为０分。 １．２．４脊髓组织病理学观察ＳＣＩ：７２ ｈ后，腹腔 麻醉，暴露心脏，生理盐水冲洗血管后，用４０ ｇ／Ｌ 多聚甲醛２５０ ｍＬ灌注固定脊髓组织。３０ ｍｉｎ后 取ＳＣＩ节段及相邻脊髓节段长约１ ＣＦＩＩ用甲醛固 定４８ ｈ后，分别按节段行石蜡包埋，连续切片作 ＨＥ染色，光镜下观察组织变化。 １．２．５脊髓组织含水量测定：各时点在致伤部 位取脊髓组织，称取湿重，置于１１０℃烘箱中烘烤 ２ ｄ，至恒重后称取干重，根据公式计算：脊髓含 水量％＝［（湿重一干重）÷湿重］×１００％。 １．２．６统计学分析：采用ｓｔａｔｅ １０．０统计软件进 行处理，数据以３２±ｓ表示，组间均数比较采用两 两比较，方差分析。Ｐ＜０．０５为差异具有统计学 意义 ２ 结 果 ２．１神经运动功能的评估 由表１可见术后Ａ组大鼠功能完全恢复。Ｃ 组与Ｂ组相比较２４、４８ ｈ ２个时问点大鼠后肢运 动功能均有所改善，但２４ ｈ时已出现明显差异 （Ｐ＜０．０５），４８ ｈ时差异更为显著（Ｐ＜０．０１）。 表１各组大鼠ＳＩ２Ｉ后１。２４。４８ ｈ神经运动功能 评分变化《孟± ） 与Ｂ组相比较， Ｐ＜０．０５，一Ｐ＜０．０１ ｏ ２．２大鼠脊髓组织病理学改变 大鼠脊髓组织ＨＥ染色光镜下可见Ａ组脊髓 组织结构正常，神经元轮廓清楚，核仁清晰可见， 胞质均匀深染（图１Ａ）。ＳＣＩ后４８ ｈ Ｂ组神经组 织多灶性出血并有大量神经元坏死、核固缩变小， 细胞间质部分疏松、变大（图１Ｂ）。Ｃ组神经组织 结构损伤轻微，细胞轻度肿胀，胞质均匀（图 １Ｃ）。 ２．３对损伤段脊髓组织含水量的影响 ＳＣＩ后Ｂ、ｃ各组的损伤段组织含水量均与Ａ 组有明显差异（Ｐ＜０．０５）。ＳＣＩ后２４ ｈ时Ｃ组与 Ｂ组相比明显较低（Ｐ＜０．０５），４８ ｈ差异更显著 （Ｐ＜０．０１）（表２）。 表２各组大鼠ＳＣＩ后１、２４、４８ ｈ脊髓组织含水量比较 （ ± ， ＝６） 与Ａ组相比较， Ｐ＜０．０５， Ｐ＜０．０１； 与Ｂ组相比较， Ｐ＜０．０５， Ｐ＜０．０１。 第３期 田小武等：红花注射液对大鼠脊髓损伤后继发性水肿的影响 。ｌ７・ 图１大鼠脊髓组织ＨＥ染色（４００倍） Ａ：Ａ组；Ｂ：Ｂ组；Ｃ：Ｃ组 ３讨论 其结果提示红花注射液对ＳＣＩ后脊髓组织水肿可 有明显的抑制作用，且４８ ｈ时作用最明显。神经 运动功能的评估中Ｃ组与Ｂ组相比较２４，４８ ｈ ２ 个时间点大鼠后肢运动功能均有所改善，但２４ ｈ 时已出现明显差异，进一步验证了ＳＣＩ后，红花注 射液可通过降低血管通透性，抑制脊髓水肿的发 生发展，从而减轻脊髓组织的损伤，促进运动功能 的恢复，为临床使用红花注射液治疗ＳＣＩ提供了 理论基础。 参考文献 ［１］周玉枝，陈欢，乔莉，等．红花化学成分研究［Ｊ］．中 ＳＣＩ的最大危害就是能够造成神经损伤，研 究发现神经损伤主要由原发性损伤和继发性损伤 两大机制引起 ，涉及多个环节。虽然说临床 ＳＣＩ对神经组织的损伤应该与脊柱所受的创伤力 大小有关，但事实上，ＳＣＩ后一系列的生理、生化 变化（即继发性反应）却并非与之完全相关，而继 发性损伤导致的神经损伤更为明显。 继发性损伤包括水肿、炎症反应、局部缺血， 生长因子和细胞因子浸润、脂质过氧化、兴奋性氨 基酸毒性、细胞内钙超载等 ，其中水肿所导致 的继发性损伤危害极大，可迅速引起受损局部缺 国药物化学杂志，２００５，１７（６）：３８０． ［２］ 郑为超，陈铎葆，张雷，等．红花黄色素对缺血心肌的 血，组织坏死等，使ＳＣＩ更加恶化，但其具有可逆 影响及机制研究［Ｊ］．中国药理学通报，２００５，２１（８）： ９７８． 性和可性，然而遗憾的是目前临床实际上还 没有找到能够实现这种逆转十分有效地方法。 红花是菊科植物，红花注射液为中药红花中 提取的水溶性部分，主要成分为红花黄色素、红花 醌苷、红花素、新红花苷，其功效主治：活血化瘀， 消肿止痛 。本草纲目记载有“活血、润燥、止 ［３］夏玉叶，阕畅，盛雨辰，等．羟基红花黄色素Ａ对大鼠 脑缺血损伤的神经保护作用［Ｊ］．中国医药工业杂志， ２００５，３６（１２）：７６０． ［４］Ｄｕｍｏｎｔ Ｒ Ｊ，Ｏｋｏｎｋｗｏ Ｄ Ｏ，Ｖｅｒｍａ Ｓ，ｅｔ ａ１．Ａｃｕｔｅ ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ ｉｎｊｕｒｙ，ｐａｒｔ Ｉ：ｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｅ ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ［Ｊ］．Ｃｌｉｎ Ｎｅｕ— ｒｏｐｈａｒｍａｃｏｌ，２００１，２４（５）：２５４． 痛、散肿、通经”功效，临床上广泛应用于治疗冠 【５］ 李玉美，余资江．骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤的 研究进展［Ｊ］．局解手术学杂志，２０１０，１９（１）：５６． ［６］ 焦杰君，蒋建农，都斌，等．银杏叶提取物ＥＧｂ７６１对大 鼠脊髓损伤后神经损伤恢复的影响［Ｊ］．实用临床医药杂 志，２０１０，１４（１５）：５． 心病、心绞痛、脑血栓、脉管炎等心脑血管疾病。 本实验中病理结果显示，ＳＣＩ后４８ ｈ，Ａ组脊髓 组织结构正常，Ｂ组神经组织多灶性出血并有大 量神经元坏死，细胞间质部分疏松，变大；Ｃ组神 经组织结构损伤轻微，细胞轻度肿胀，胞质均匀。 与其一致，组织含水量数据同样显示：ＳＣＩ后Ｂ、ｃ 组其损伤段组织含水量均与Ａ组有明显差异（Ｐ ＜０．０５），表明ＳＣＩ后组织会引起严重的继发性 组织水肿；然而Ｃ组中红花注射液的应用，使得 ＳＣＩ后２４ ｈ时Ｃ组组织含水量与Ｂ组相比明显 较低（Ｐ＜０．０５），４８ ｈ差异更显著（Ｐ＜０．０１）， ［７］ 陈光学，贺国洋，陆地，等．雌激素对脊髓继发性损伤 保护作用的研究［Ｊ］．新乡医学院学报，２０１０，２７（５）： ４４７． ［８］杜润法．红花注射液治疗不稳定型心绞痛疗效评价［Ｊ］． 中国临床保健杂志，２００９，１２（１）：６６． ［９］周伟进，蒋晓松，朱思平，等．红花注射液对梗阻性肾病 解除梗阻后肾功能恢复的机制研究［Ｊ］．海南医学院学报， ２００８，１５（３）：２０７．
